林华城，刘海琴，马华根，唐元瑜

（1福建中医药大学第二临床医学院；2福建中医药大学中西医结合学院；3福建中医药大学中医学院，福州350122）

视网膜微血管，主要是由一层单层扁平上皮细胞构成，其调节血压功能和屏障功能容易受到心[1]、脑[2]、肾[3]或血液循环等[4]病变的影响而发生管壁形态改变以及渗出、出血、新生血管增生等病变[5]。视网膜血管病变危害性大，具有致盲性，近年来其发病率不断升高，如何延缓视网膜血管病变的发展进程，已成为临床医生及医学科研人员亟需攻克的难题[6，7]。视网膜微血管内皮细胞（retinal microvascular endothelial cells，RVECs）是构建视网膜血管病理模型的重要工具细胞之一。由于人的视网膜获取途径较少，因此与人高度同源的大鼠视网膜血管内皮细胞便成为了目前研究视网膜血管病变最广泛的选择。本研究拟建立一种高效、简易、细胞获取量多、纯度高的大鼠RVECs培养方法，为后续视网膜血管疾病的研究奠定重要的细胞生物学实验基础。

材料和方法

1 实验动物

6～8周龄的SPF级Sprague-Dawley大鼠5只，雌雄不拘。购自福建医科大学实验动物中心，动物质量合格证号SCXK（闽）2016-0002。

2 主要试剂及仪器

胎牛血清（美国Gibco公司）；肝素钠（南京新百药业有限公司）；Ⅱ型胶原酶（北京鼎国生物公司）；胰蛋白酶-EDTA消化液（南京凯基生物公司）；即用型SA1022—兔IgG/SABC免疫组织化学染色试剂盒、兔抗大鼠VIII因子相关抗原抗体、DAB显色剂（武汉博士德生物公司）。超净工作台（苏净集团安泰空气技术有限公司）；低速离心机（中国湖南湘仪公司）；……