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两种操作方法在EBER原位杂交染色中的比较与应用

2021-07-08李真真王九菊马钰

李真真,王九菊,马钰*

(1陕西省人民医院病理科,西安 710068;2陕西省人民医院血研室,西安,710068)

EB 病毒 ( Epstein-Barr virus,EBV) 越来越受到人们的关注,这不仅因为它以潜伏感染的形式广泛存在于健康人群,更重要的是它与越来越多的恶性肿瘤关系密切[1]。EB病毒编码的小RNA(Epstein–Barr virus-encoded small RNAs,EBER)在被感染的细胞核中以高拷贝数存在[2]。因此,EBER的相关检测已经成为EB病毒最重要的检测手段。EBER 显色原位杂交技术(chromogenicin situhybridization,CISH)具有定位作用,能够确定病毒与组织和细胞关系,EBER 原位杂交已成为公认的标准方法[3]。目前在各大中型医院中,EBER原位杂交主要采用的是手工染色的方法。随着全自动免疫组化染色机的广泛应用,EBER原位杂交也逐渐应用全自动免疫组织化学染色机进行。我们通过对两种不同染色方法的对比研究,发现应用全自动免疫组织化学染色机的方法用时短,定位准确,对比鲜明,明显优于手工染色。

材料与方法

1 标本来源

选取陕西省人民医院病理科EBER原位杂交阳性病例35例,其中胃髓样癌1例,鼻咽癌16例,NK/T细胞淋巴瘤5例,Burkitt淋巴瘤2例,胃腺癌2例,弥漫大B细胞淋巴瘤2例,血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤2例,经典型霍奇金淋巴瘤2例,淋巴组织不典型增生2例,急性重症EBV感染1例。每例切片两张,厚度4μm,分为仪器组和手工组。仪器组用全自动免疫组织化学染色机进行染色,手工组用手工染色的方法进行染色。

2 仪器设备

全自动免疫组织化学染色仪购自罗氏诊断公司,仪器型号为BenchMark XT。孵育盒、恒温箱、杂交仪。

3 试剂

仪器组试剂为罗氏诊断公司生产的ISH Protease 3、INFORM EBER Probe、iVIEW Blue Detection、ISH Red Counterstain。……

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