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超声刺激在红藻氨酸诱导的癫痫小鼠中呈现抗癫痫和海马神经保护作用

2021-07-08梁燕张保朝傅国惠

关键词:海马癫痫小鼠

梁燕,张保朝,傅国惠

(南阳市中心医院神经内科,南阳 473000)

癫痫是常见的神经系统疾病之一。癫痫发作时,大脑局部神经元群异常同步化放电,继而扩散并导致反复性、短暂性神经功能失常[1]。癫痫的发病机制尚不清楚,临床癫痫治疗主要通过药物和手术[2]。抗癫痫药物需要长期服用,具有明显副作用[3-4],因此研究非药物途径的癫痫治疗方法具有重要意义。超声波是一种机械波,频率超出人耳分辨范围。早在上个世纪,超声刺激(ultrasound stimulations,US)就被证明对神经组织具有可逆的生理效应[5]。现在的研究也表明,US在缺血性脑损伤中具有保护作用[6],而US在癫痫中的作用还并不清楚。

红藻氨酸(kainate,KA)是目前常用的化学致癫药物,本实验主要通过KA建立小鼠癫痫模型,分析KA对小鼠癫痫行为以及癫痫发作时脑电活动变化的影响,并研究KA对小鼠海马CA3区神经元退化变性以及星形胶质细胞活化增生的影响。

材料和方法

1 主要试剂

红藻氨酸(KA)购于上海源叶生物科技有限公司; Triton X-100购于武汉纯度生物科技有限公司;神经元核抗原(neuronal nuclei antigen,NeuN)兔单克隆抗体和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)兔单克隆抗体购于英国Abcam公司;Fluoro-Jade B(FJB)荧光探针购于美国AAT Bioquest公司;Alexa Fluor 594标记山羊抗兔IgG(H+L)购于美国Jackson公司;尼氏染色液(甲苯胺蓝法)和SP免疫染色试剂盒购于北京索莱宝科技有限公司。

2 实验动物

7~8周龄雄性C57BL/6J小鼠购自河南省实验动物中心,许可证号为SCXK(豫)2017-0001。所有小鼠被饲养在SPF级动物房中,自由进食饮水。动物房的温度维持在23±1℃,湿度维持在50%~65%,昼夜12 h/12h循环光照。……

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