林裕贵 庞夏凤 李程颐 孙增辉 朱银川 王熹婧 林春秀 张增峰

(1 广西医科大学微生物学教研室，南宁市 530021，电子邮箱：18324180870@163.com；2 江南大学食品学院，江苏省无锡市 214122)

研究表明，H6N6亚型禽流感病毒(avian influenza virus，AIV)已经在欧亚地区的野禽和家禽中广泛流行，其感染宿主的范围不断扩大，从主要感染水禽逐渐进化为感染陆禽、哺乳动物，甚至具有感染人类的潜能[1]。前期研究结果显示，陆禽H6N6亚型AIV已经具备感染哺乳动物猪及人类的潜能[2-3]。水禽鸭、鹅在流感病毒生态系统中起非常重要的作用，然而水禽H6N6亚型AIV是否具有感染哺乳动物猪及人类的潜能，目前仍未完全清楚。本研究将前期分离出的2株水禽流感病毒鸭H6N6亚型AIV A/DK/GX/750/2010(简称GX750)、鹅H6N6亚型AIV A/GS/GX/399/2010(简称GX399)，进行基因测序和遗传进化分析，以了解其基因来源和基因特点，然后通过体外感染猪肺和人肺组织来检测病毒的复制能力和组织病理改变，旨在探讨水禽H6N6亚型AIV感染哺乳动物猪及人类的潜能及其跨物种传播风险，为H6N6亚型AIV的监测和防控提供依据。

1 材料和方法

1.1 实验毒株及组织标本 两株H6N6亚型AIV GX750、GX399分离于2010年广西南宁市活禽交易市场；选择先前已证实能在猪和人肺组织有效地复制的H9N2亚型AIVA/DK/GX/767/2010(简称GX767)作为阳性对照病毒株。将病毒接种于10日龄的无特定病原体级鸡胚(广西富凤农牧集团有限公司)进行扩增，采用血凝试验和半数组织培养感染试验(50%tissue culture infective dose,TCID50)分别检测病毒滴度和感染力(见表1)。新鲜猪肺组织取自4～5月龄的无特定病原体级巴马香猪(广西大学动物……