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miR-373靶向调控同源异型盒基因B3表达影响子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学特性的实验研究

2021-07-07周训玺彭敏贺晓琪孙国强

安徽医药 2021年7期

周训玺,彭敏,贺晓琪,孙国强

越来越多的研究显示,异常表达的微小RNA(microRNA,miRNA,miR)可通过影响肿瘤细胞的生物学行为参与子宫内膜癌细胞的发生发展。miR-373是miR-371-372-373家族成员,定位于人19q13.42染色体上,在皮肤鳞状细胞癌和非小细胞肺癌等肿瘤中常见异常表达,且可通过影响细胞生物学功能在肿瘤恶性进展中发挥着癌基因或抑癌基因的作用。同源异型盒基因B3(HOXB3)是同源异型盒基因(HOX基因)家族成员,被证实在结直肠癌和胰腺癌等肿瘤中异常表达,通过影响细胞增殖、迁移和凋亡等参与肿瘤的发生发展。miR-373在子宫内膜癌组织中异常高表达,与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移等紧密相关,且对癌细胞增殖、侵袭和迁移具有促进作用;然而,miR-373影响子宫内膜癌生物学行为的作用机制并不完全清楚。HOXB3被证实在子宫内膜癌组织中低表达,发挥抑癌作用。本研究通过生物信息学软件预测发现miR-373与HOXB3 3’非编码区(Untranslated Region,UTR)存在互补结合位点,猜测miR-373可能通过靶向HOXB3调控子宫内膜癌发生发展。因此,本研究从2018年2月至2019年6月,开展体外细胞实验旨在观察miR-373通过靶向调控HOXB3对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭和凋亡的调控作用,以期为子宫内膜癌的发病机制和治疗提供新线索。

1 材料与方法

1.1 实验材料

人子宫内膜癌细胞株Ishikawa(上海复祥生物公司),胎牛血清和胰蛋白酶(美国Gibco公司),青霉素-链霉素双抗、脂质体2000和Trizol试剂(美国Invitrogen公司),HOXB3抗体(美国Abcam公司),miR-373抑制剂(inhibitor)及抑制剂阴性对照(inhibitor-NC)(上海吉玛公司),HOXB3 siRNA及其阴性对照NC siRNA(美国SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY公司),psiCHECK2荧光素酶载体(西安赛拓博泰生物公司)。……
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