王涛，王庆泊，岳浩洋，张贵东，苑昭奖，连晓华，李恩君，刘博

胃癌（Gastric cancer，GC），是继肺癌之后，死亡率最高的常见恶性肿瘤，已成为全世界主要的健康负担。中国的胃癌发病例数每年近40万，约占全球的42.6%，死亡率高达45%，因此我国面临着十分严峻的抗击胃癌形势。DNA甲基化是表观遗传途径的基本调控方式，抑癌基因、DNA修复基因启动子的异常甲基化，会抑制基因的转录，导致功能丧失，与肿瘤的发生和发展相关，已有报道肿瘤抑制基因

APC

在多种肿瘤中高度甲基化的情况。地西他滨（Decitabine，DAC）是一种天然2′-脱氧胞苷酸的腺苷类似物，通过抑制DNA甲基转移酶，减少DNA的甲基化，为目前已知最强的DNA甲基化特异性抑制剂。地西他滨作为抗肿瘤新药，在实体瘤中的作用报道较少。本研究以胃癌AGS细胞为研究对象，探究地西他滨对AGS细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

DMEM/F12培养液、RPMI1640培养液、胎牛血清和胰蛋白酶购买于美国HyClone公司；TRIzol试剂购买于美国Invitrogen公司；基因组DNA提取试剂盒、琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒购买于天根生化科技（北京）有限公司；RNA反转录试剂盒（Advantage RT-for-PCR）、实时荧光定量PCR试剂盒（Premix Taq™Version 2.0）购买于宝日医生物技术（北京）有限公司；T-A克隆载体（pGEM-T载体系统）购买于上海普洛麦格生物产品有限公司；亚硫酸氢钠转化试剂盒（EpiTect Fast Bisulfite Conversion Kits）购买于德国QIAGEN公司；APC一抗（兔来源）、二抗购买于美国Cell Signaling Technology公司；MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒购买于碧云天；DH5α化学感受态细胞购买于南京诺唯赞生物科技有限公司；PCR引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成；……