房旭 黄郁晶 阮强 刘维贤

口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinomas，OSCC)是头颈部发病率最高的恶性肿瘤，老年人群发病率较高，容易发生侵袭和转移，严重影响晚年生存质量。尽管OSCC的临床诊断及治疗不断进步，病人术后5年的存活率仍低于50%[1]。

核仁小RNA(small nucleolar RNA，snoRNA)是一类真核细胞核仁中60～300个核苷酸长度的非编码RNA，主要参与核糖体RNA(rRNA)转录后的成熟加工过程。近年来研究表明,snoRNA与肿瘤的发生、发展密切相关[2]。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类长度约22个核苷酸的小分子非编码RNA, 转录后调节靶基因的表达水平[3]。通过调节靶基因的表达, 在细胞的分化、增殖、迁移等过程中具有重要作用[4]。开展snoRNA和miRNA与OSCC关系的研究有可能为OSCC的诊断和治疗提供新线索[5]。本研究通过筛选老年OSCC病人的snoRNA及miRNA，选定与OSCC各临床指征相关、可作为对其诊断或预后具有参考价值的肿瘤生物标志。

1 材料与方法

1.1 样本收集 选取2016年1～8月盛京医院口腔外科手术治疗OSCC病人9例，以及病理科保存石蜡包埋OSCC组织标本35例，合计44例。病人年龄均≥60岁，均经病理学诊断为OSCC。病人不合并其他疾病，无器质性疾病和既往恶性肿瘤史。新鲜及石蜡鳞癌样本TNM分期Ⅰ～Ⅳ期分别为21、9、4、10例。根据肿瘤病理分级低、中、高分别为3例、8例、33例。另外选取正常口腔组织作为对照，包括2016年1～8月13例手术治疗病人术中切取口腔正常黏膜或舌组织0.5 cm3，以及病理科保存石蜡包埋正常口腔组织标本10例，合计23例。

本研究经盛京医院伦理委员会批准，得到所有病人允许并签属知情同意书。

1.2 RNA提取 (1)新鲜组织总RNA的提取：用经焦碳酸二乙酸处理过的剪刀将新鲜组织标本剪碎，采用AxyPrep公司的组织细胞总RNA提取试剂盒提取新鲜组织标本总RNA。……