薛盛丁 陈辉 刘爽 朱蓉嵘 王诗逸 俞莹

早产儿视网膜病变(ROP)是一种发生于早产儿尤其是低体质量儿的视网膜血管性疾病，是婴幼儿致盲的最主要原因。ROP的主要特征是视网膜新生血管的形成，其中涉及到多种视网膜细胞，如视网膜内皮细胞、胶质细胞、色素上皮细胞等，并受众多因素的调控，其发病机制尚未完全明确。甲酰肽受体(Fpr2)属于G蛋白偶联趋化因子受体家族，在血管内皮细胞、小胶质细胞、星形胶质细胞、皮肤成纤维细胞等均有表达，在炎症反应、细胞增殖、血管增生中发挥重要的免疫调控作用。本研究利用Fpr2-/-小鼠和C57BL/6J小鼠构建氧诱导视网膜病变(OIR)模型，通过观察各组小鼠视网膜中神经胶质细胞的改变、新生血管的生成情况，进而探讨Fpr2在OIR小鼠中的作用机制。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物本研究采用的SPF级C57BL/6J (B6)孕鼠、Fpr2-/-孕鼠均由南通大学医学院动物中心饲养繁殖。在模型制作过程中，所有小鼠均由实验动物中心统一饲养，室温控制在20 ℃±5 ℃。实验动物的使用和饲养均符合国家科学技术部发布的《实验动物管理条例》。

1.1.2 材料实时荧光定量PCR(RT-PCR)试剂盒、逆转录试剂盒均购自美国赛默飞科技公司；一抗:抗FPR2 [GM1D6] (ab26316)、抗离子化钙结合适配分子1(IBA1) [EPR16589] (ab178847)、抗CD31 [MEC 7.46] (ab7388)、抗神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)(ab7260)、抗波形蛋白(Vimentin)(ab45939)、抗ki67(ab15580)和荧光二抗均购自美国Abcam公司；抗p-P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、抗P38 MAPK、抗细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、抗p-ERK1/2和Western blot二抗均购自美国细胞信号技术公司。冷冻高速离心机(Eppendorf，德国)，解剖显微镜、光学显微镜、荧光显微镜(Leica，德国)，RT-PCR仪(Applied Biosystems，美国)。……