喻博识，陈文娟，陈小慧，王星云，余章斌，韩树萍

新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019，COVID-19)对全球人类健康构成重大威胁。COVID-19潜伏期平均5～7 d，因年龄及免疫状况差异，患者从症状出现到死亡时间为6～41 d，70岁以上患者重症率明显高于70岁以下；轻、中症患者症状轻微，以发热、乏力和干咳为主，部分患者可出现呼吸困难、低氧血症和急性呼吸窘迫综合症，发展为重症肺炎而危及生命；住院患者中因感染导致的心肌损伤(心肌炎、心肌缺血等)发生率很高，此外恶心、呕吐和腹泻等胃肠道症状也较常见；COVID-19由新型冠状肺炎病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)感染引起，SARS-CoV-2利用冠状病毒刺突糖蛋白(S蛋白)与宿主血管紧张素转换酶2(angiotensin-converting enzyme 2，ACE2)受体结合进入细胞，而S蛋白则需要跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane protease serine 2, TMPRSS2)的启动激活，TMPRSS2-SARS-CoV-2 S蛋白-ACE2感染轴被认为是SARS-CoV-2感染宿主细胞的潜在入侵通路；SARS-CoV-2与SARS-CoV有88%的同源性，但SARS-CoV-2 S蛋白与细胞表面ACE2受体的结合能力是SARS-CoV S蛋白的10～20倍，表明SARS-CoV-2具有更强传染能力，这也是目前COVID-19全球大流行的原因之一。该研究拟检测ACE2与TMPRSS2在小鼠不同年龄、不同组织中基因和蛋白的表达，揭示COVID-19的易感年龄与潜在靶器官。

1 材料与方法

1.1 材料

1

.

1

.

1

实验动物及分组 根据文献所述小鼠年龄分段标准，于南京医科大学医药实验动物中心购买不同年龄雄性C57BL/6小鼠共12只，均分为四组：新生组，1～3日龄；幼龄组，1月龄；成年组，3月龄；老龄组，18月龄。

1

.

1

.

2

主要试剂与仪器 TRIzol 购自美国Invitrogen 公司；动物组织总RNA 提取试剂盒购自北京天根公司；逆转录试剂盒及PCR试剂盒购自日本TAKARA公司；ACE2、TMPRSS2和GAPDH引物序列由查询基因序列网站(https://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/)所得，并委托南京锐真生物科技公司合成；……