贾洪川，魏华威，姚 华

1 北京农学院动物科学技术学院，北京昌平区 102206

2 北京优尼赛斯科技有限公司，北京朝阳区 100024

3 中华人民共和国北京海关，北京朝阳区 100006

0 引言

在奶牛养殖过程中，抗生素用于牛只疾病预防及治疗，使用频繁[1]。原奶中抗生素残留既会对人类健康产生不利影响，也会让奶牛产生抗生素耐药性，增加疾病治疗的难度等[2～4]。戴尔沃牛奶抗生素检测试剂盒（Delvotest SP NT）是目前在奶牛养殖基层原奶抗生素残留检测应用最普遍的方法之一，该方法采用嗜热芽孢杆菌抑制法，是国际抗生素残留检测的“金标准”[5]。其原理是培养基微孔中预先混合好嗜热脂肪芽孢杆菌芽孢，并含有pH指示剂（溴甲酚紫），加入样品并在64℃左右孵育，若样品中不含有抗生素或者抗生素浓度低于检出限，细菌芽孢在培养基中生长不受抑制，并利用糖产生酸，pH指示剂则会由紫色变成黄色。相反，如果加入的样品含有抗生素或抗生素浓度高于检出限，则细菌生长受抑制，培养基不会变色，仍为紫色[6]。本文参照牛乳中兽药残留国家要求[7]，对Delvotest SP NT灵敏度进行了验证试验。

1 试验设备与材料

1.1 试验设备

10μL、100μL和1L的移液枪头及配套移液器，（64±2）℃恒温水浴锅或金属温育器，0.01g电子秤，100mL量筒，5mL一次性离心管。

1.2 试验材料

Delvotest SP NT：批次17B20A35，青霉素G、头孢氨苄、林可霉素各1mg/kg浓度的标准品，脱脂牛乳粉，纯净水。

2 试验步骤

2.1 脱脂乳的配置

使用离心管称取1g脱脂牛乳分粉，然后加入9mL纯净水，混匀备用。

2.2 样本制备

吸取10μL青霉素G标品，加入990μL脱脂乳中，100.0倍稀释，得到10μg/kg青霉素G的稀释液，然后再进行2.5倍稀释得到4μg/kg青霉素浓度的脱脂乳样品。……