小鼠透明骨骼塑化包埋标本的制作研究*
2021-07-01李雁羽刘天润
生物学通报 2021年9期
关键词:小鼠
李雁羽 刘天润 吴 启 王 磊
(安徽农业大学生命科学学院 安徽合肥 230036)
透明骨骼标本是通过透明剂、染色剂、脱色剂的处理,让动物肌肉组织透明化,骨骼由染色剂凸显出形状的标本[1-3]。染色剂中的茜素红可特异性与硬骨中的钙结合,让其呈现红色,而阿利新蓝在合适的pH 值下可让软骨中硫酸软骨素、硫酸角质素等主要成分呈现蓝色。二者配合使用,可让观察者透过肌肉组织直观地观察动物体内硬骨和软骨的结构和分布[4]。
为了让包埋剂起到更好的包埋效果,需对透明骨骼标本进行塑化处理,而聚乙二醇可用于简易塑化标本的制作[5-6]。PEG-600,即分子量为600的聚乙二醇,常温下为液态,是水溶性聚合物,利用梯度浸渍的方法可让PEG-600 对生物标本起到较好的塑化作用。传统的包埋标本使用的AB胶(室温固化环氧树脂)固化时间较长,UV 胶(又称“紫外光固化胶”)是一种必须通过紫外光照射才能固化的胶粘剂,固化速度快,透光性强,它作为包埋剂已应用于植物标本制作领域[7]。
本研究工作主要通过塑化技术处理透明骨骼标本,再利用UV 胶的紫外固化特性实现快速包埋,改良了透明骨骼标本的保存方法,使其便于运输,促进其实现商业化生产及推广应用[8-9]。
1 材料与方法
1.1 实验材料 出生2~4 d 的小鼠、无水乙醇、丙酮、茜素红、阿利新蓝、氢氧化钾、甘油、PEG-600、UV 胶、长方体硅胶模具(大小:50 mm×85 mm×50 mm)。
1.2 实验方法
1)初步处理方法。处死小鼠,剥离皮肤,在接近肢端时不要剥离皮肤,避免损伤小鼠趾端和尾部的结构,去除其内脏,并用清水冲洗干净。……
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