OTUB2表达下调对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及PI3K/AKT信号通路的影响*
2021-07-01任舒婷魏晓巍任传路
任舒婷,魏晓巍,任传路△
1.中国人民解放军联勤保障部队第九〇四医院检验科,江苏无锡 214044;2.南京医科大学第二附属医院检验医学中心,江苏南京 210011
胃癌是全球最常见的肿瘤之一,由于早期症状不明显,大多数胃癌患者在确诊时已处于晚期或出现远处转移[1-3]。胃癌致病和转移机制的复杂性和多因素性被认为是降低该病患者生存率的主要原因。目前,迫切需要能早期识别胃癌进展的关键分子标志物,以帮助临床早期治疗,改善患者预后。含OTU结构域的泛素醛结合蛋白2(OTUB2)是一种去泛素化酶,属于卵巢肿瘤超家族蛋白,首次在果蝇卵巢肿瘤基因中被发现[4]。研究表明,OTUB2有广泛的生物学作用,包括防止病毒诱导激活干扰素调节因子3 (IRF3)和核因子-κB(NF-κB)[5],促进人类胰腺胰岛β细胞生存[6],并维持DNA修复途径,促进乳腺癌和肺癌的进展和转移[7-10]。然而关于OTUB2在胃癌发生、发展中的作用尚不清楚。本研究观察了下调OTUB2对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响,现将结果报道如下。
1 材料与方法
1.1细胞来源 人胃癌细胞系MGC-803购自美国典型培养物保藏中心(ATCC)。
1.2仪器与试剂 ABI Prism 7000荧光定量PCR仪购自美国ABI公司,DMEM培养基和胎牛血清购自美国Gibco公司,Lipofectamine 2000转染试剂和Trizol试剂购自美国Invitrogen公司,OTUB2小干扰RNA(si-OTUB2)及其对照si-NC购自上海吉玛制药技术有限公司,PrimeScript RT试剂盒和SYBR Premix ExTaq RT-PCR试剂盒购自日本Takara公司,TaqMan试剂盒购自美国BioVision公司,OTUB2和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成,CCK-8试剂盒购自……
