沈卫锋，郭 琦，刘 莉，牛宝龙，翁宏飚，楼 宝

(浙江省农业科学院 水生生物研究所，浙江 杭州 310021)

微孢子虫(microsporidia)是一种单细胞的真核内寄生虫，广泛寄生于虾、甲壳类等动物。虾肝肠胞虫(Enterocytozoonhepatopenaei，EHP)是微孢子虫的一种，属于肠胞虫科、肠胞虫属，最早于2009年在泰国养殖的斑节对虾(Penaeusmonodon)中发现，随后在亚洲各国的凡纳滨对虾、脊尾白虾和中国对虾养殖区陆续有EHP检出[1]。研究表明，EHP的感染途径较广，可通过污染的养殖水体和病虾进行水平传播，也可以通过受精卵和虾苗进行垂直传播[2]。EHP感染的对虾初期没有明显症状，但随着病程的发展体色、胃、肠均表现出明显异常，体色发白、肠道吸收功能下降，严重的出现肝胰腺萎缩，个别虾体还会出现白便症状。由于该病在早期难以发现，往往要养殖30～45 d以上才会表现出生长缓慢，不长个的现象，因此，极易造成饲料空耗，给养殖户带来巨大的经济损失[3-4]。近几年，EHP在全世界范围内传播，中国、马来西亚、越南、印度尼西亚、泰国已经成为了重灾区，印度和墨西哥也有发现，极大地打击了虾农的养殖积极性。

常用的EHP检测方法包括：组织病理学观察、电子显微镜观察、PCR、原位杂交等[5-10]，其中PCR方法因其高特异性、高灵敏度的优势而被广泛使用。目前，EHP的PCR检测方法已有一定数量报道，且主要集中在以一个核糖体小亚基作为PCR的目的基因[7，10]。经NCBI检索，我们发现该扩增的目标区域与其他微孢子虫的核糖体序列具有较高同源性，因此，用这些方法进行EHP检测容易造成非特异性扩增，从而增加假阳性率。……