孙飞，黄用豪

（天津市人民医院麻醉科，天津300121）

结直肠癌是消化道最常见恶性肿瘤之一，具有发病率高、恶性程度高、预后不良等特点，严重危害人类生命健康[1-2]。结直肠癌细胞持续性无限增殖、浸润及转移是导致患者死亡的主要原因。七氟醚是临床常用的吸入性麻醉药物，广泛应用于多种手术，与恶性肿瘤关系密切，参与胶质瘤、骨肉瘤、乳腺癌等肿瘤细胞生物学行为变化过程[3-5]。microRNA（miRNA）是一类非编码RNA，参与细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移等生理过程，microRNA-203（miR-203）是miRNA 家族中重要一员，是抑癌非编码小分子RNA 之一，其表达水平与肿瘤发生发展过程密切相关[6]。既往研究发现，七氟醚可以通过调控miR-203 表达影响肿瘤细胞生物学行为，但其在结直肠癌方面报道较少[7]。本研究通过体外实验观察七氟醚对人结直肠癌HCT116细胞侵袭、迁移的影响以及对miR-203 的调控作用，探讨其可能作用机制，为临床诊治结直肠癌提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞系人结直肠癌细胞株HCT116 购于中国科学院上海细胞库。

1.1.2 药物、主要试剂和仪器七氟醚（美国Baxter公司），DMEM 培养基、胎牛血清（FBS）（美国Gibco公司），Transwell 细胞培养小室（美国Corning 公司），900 型麻醉机（美国欧美达公司），miR-203 过表达质粒及相应空载体质粒（上海吉凯基因化学技术有限公司），兔抗人细胞外信号调节激酶（ERK）多抗、p-ERK 多抗和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）多抗（美国CST 公司），山羊抗兔IgG-HRP（美国Abcam 公司）。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养人结直肠癌HCT116 细胞接种于DMEM 培养基（质量分数10% FBS+100 u/ml 青霉素+100 μg/ml 链霉素），置于体积分数5%二氧化碳CO2培养箱内37℃培养，2～3 d 传代1 次，取对数增殖期细胞用于后续实验。……