董 航，张海晖，窦桂芳，孟志云，叶 彤，朱晓霞，顾若兰，吴卓娜，甘 慧

（军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所，北京 100850）

γ射线是一类穿透性极强的射线，机体在短时间内吸收1 Gy以上剂量的γ辐射会引发急性放射病（acute radiation disease，ARD），肝受损后会发生肝功能异常、纤维化等病变，进而严重损害碳水化合物和脂质的代谢，影响机体健康［1-4］。细胞色素P450酶（cytochrome P450，CYP450）主要存在于肝中，参与70%～80%药物代谢，其中CYP1A2主要参与芳香族化合物、杂环胺、硝基芳香化合物和霉菌毒素等致癌物质的代谢，CYP2C9参与13%～17%临床药物代谢，CYP2D6介导20%～30%处方药物的生物转化［5-8］。有研究发现，辐射可在一定程度上诱导或抑制肝药物代谢酶表达和活性，如双氧铀硝酸盐可显著降低大鼠CYP2C11蛋白表达水平，对CYP1A2和CYP2B1/2表达无显著影响；大鼠全身照射X射线，CYP活性显著降低；UV-B辐射可导致人皮肤组织CYP1A1活性和蛋白表达水平的升高［9-11］。本研究通过观察6 Gy γ射线辐射对大鼠肝代谢酶CYP1A2，CYP2C9和CYP2D6在蛋白表达和微粒体活性水平的变化，为辐射后机体药物代谢研究及相应临床用药研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 药品和试剂

色谱级乙腈、甲酸和甲醇（Fisher Scientific公司，美国）；蔗糖、甘油、磷酸氢二钾、浓盐酸、氯化镁和乙醇（国药集团化学试剂有限公司）；NADPH再生循环系统和96孔细胞培养板（Corning公司，美国）；普萘洛尔、非那西丁、双氯芬酸、右美沙芬、对乙酰氨基酚、4′-羟基双氯芬酸和右啡烷（Sigma公司，美国）；兔抗大鼠CYP1A2多克隆抗体、兔抗大鼠CYP2C9多克隆抗体和兔抗大鼠CYP2D6多克隆抗体（Biorbyt公司，英国）；小鼠抗大鼠GAPDH单克隆抗体、山羊抗小鼠IgG抗体、山羊抗兔IgG抗体和Western印迹相关试剂（北京普利莱基因技术有限公司）；……