KG-1a/NSG移植性急性髓系白血病小鼠模型的构建及其鉴定
2021-06-26李渊顾守美刘小虎周雯周玥毕玉洮郭太兵
李渊,顾守美,刘小虎,周雯,周玥*,毕玉洮,郭太兵
(1.大理护理职业学院,云南 大理 671000;2.大理大学第一附属医院 呼吸内科,云南 大理 671000;3.大理大学 组织胚胎学教研室,云南省细胞生物学重点实验室,云南 大理 671000)
0 引言
急性髓系白血病(acute myeloblastic leukemia,AML)是一种起源于AML干细胞的以髓细胞失控性增殖为特征的危及生命的恶性克隆性疾病,急性髓系白血病克隆中的白血病细胞增值失控、分化障碍、凋亡受阻,而停滞在细胞发育的不同阶段,发病时骨髓中异常的原始细胞及幼稚细胞(白血病细胞)大量增殖并浸润肝、脾、淋巴结等各种脏器,抑制正常造血,具有高度异质性[1]。AML的临床进展和预后与侵袭细胞类型、遗传学改变以及克隆的生物学特性紧密相关。尽管随着化疗方案的不断改进,患者的治疗效果已有明显改善,但复发及大剂量化疗的毒副作用仍是影响疗效进一步提高的主要障碍[2]。本研究通过免疫磁珠分选法分离纯化出CD34+CD38-KG-1a细胞,移植入NSG小鼠体内,复制急性髓系白血病小鼠模型,为进一步研究白血病的发生机制及治疗奠定了基础。
1 材料
1.1 动物
雌性NSG小鼠24只,10-12周龄,体质量25~30g。购自北京维通利华实验动物技术有限公司。在符合SPF标准的层流室中饲养。
1.2 细胞株
KG-1a细胞为重庆医科大学干细胞与组织工程研究室馈赠。
1.3 药品与试剂
IMDM1640细胞培养液(Gibco公司);胎牛血清(Gibco公司);Human anti-CD38 MicroBead Kit(APC)(Miltenyi公司);Human anti-CD34 MicroBead Kit(FITC)(Miltenyi公司);环磷酰胺水合物试剂(Sigma公司);CCK-8试剂盒(Sigma公司);瑞氏染液试剂一、二(南京建成公司);Anti CD34抗体(abcam公司);无水乙醇(国医药集团有限公司);……
