范会云 黄 勇 陈卫明 黄意成 曾庆钱

（广东省中药研究所 广东广州 510000）

土荆芥（Chenopodium ambrosioidesL.）为藜科藜属芳香性草本植物，原产于中美洲、南美和墨西哥南部，全草入药。2003 年，土荆芥被列为中国首批外来入侵物种之一［1］。目前，仅韩国对土荆芥白粉病有相关报道，认为引起韩国境内土荆芥白粉病的病原菌为Erysiphe betae［2］，中国尚未有相关报道。土荆芥被白粉菌侵染后，初期叶片出现白色粉状斑点，粉状斑点不断扩大或相连成片，后期叶面布满白色粉层，叶片变黄、变褐。

在传统的病原菌鉴定方法中，白粉菌主要以形态学为主要鉴定指标，但这种分类存在严重不足，如缺少无性世代的特征、许多子实体类型经常难以获得等［3-4］。近年来，植物病原菌在r-DNA的内转录间隔区（ITS）被广泛的应用于快速检测和鉴定植物病原菌［5-6］。目前国内尚未见土荆芥白粉病病原菌分子分类系统的相关研究报道，本文利用分子生物学技术对其分类特征及亲缘关系进行研究，以确定土荆芥白粉病菌的种类。

1 材料与方法

1.1 实验材料

白粉菌样本于2020 年5 月20 日采自广东省博罗县醪酥村农场，寄主植物为土荆芥，样品编号为MT 799 966。提取白粉菌基因组DNA 所使用的的试剂盒购自OMEGA bio-tek 公司（货号：D3390）.

1.2 实验方法

1.2.1 白粉菌样本的收集、基因组DNA 的提取和特异序列的扩增

用细毛刷轻轻地将叶片表面的菌丝与孢子混合物刷到培养皿中，转入到2 mL 离心管中，按照试剂盒说明书中的步骤提取土荆芥白粉病菌基因组DNA，并保存于-20 ℃备用。PCR反应的引物采用通用引物 ITS1 和 PM6［7-8］，PCR 反应所用的试剂是Green Taq Mix （Vazyme：P131-03）。……