葛根中黄嘌呤氧化酶抑制剂对GES-1细胞诱导的氧化应激保护作用
2021-06-24方一帆刘心越汤小胜
湖北理工学院学报 2021年3期
关键词:黄酮
冯 航,方一帆,刘心越,汤小胜
(湖北师范大学 a.食用野生植物保育与利用湖北省重点实验室,b.生物学国家级实验教学示范中心,c.生命科学学院,湖北 黄石435002)
黄嘌呤氧化酶(XO)是一种重要的胞浆酶,可以催化次黄嘌呤氧化为黄嘌呤,并进一步催化黄嘌呤氧化为尿酸。XO功能异常会导致高尿酸血症、痛风等多种疾病[1]。别嘌呤醇、别嘌硫醇和3,5-二取代-1,2,4-三唑是传统的XO抑制剂[2]。这些抑制剂因具有进行性肾功能衰竭、皮肤问题、史蒂文斯-约翰逊综合征和重型肝炎等许多不良副作用而被限制使用[3-4]。因此,需要从天然产物提取物中制备出副作用小、疗效好的XO抑制剂[5-6]。
天然产物提取物中含有生物活性化合物,其中,异黄酮类化合物是葛根提取液中的主要活性成分,对抗氧化性、高血压和糖尿病具有诸多益处[7-8]。然而,由于天然产物提取物的成分复杂、活性成分分离困难且费时,使其在相关领域的应用受到限制[9]。超滤与液相色谱-质谱联用(UF-LC-MS)是从天然化合物等复杂混合物中筛选生物活性化合物的一种有效和广泛应用的技术[10]。
本文借助UF-LC-MS法从葛根提取液中筛选XO抑制剂,对4种与XO有结合活性的化合物进行鉴定,并通过测定IC50验证其抑制性。通过评价细胞活性、细胞内ROS、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)释放和细胞凋亡等指标,研究4种抑制剂对过氧化氢(H2O2)诱导的人正常胃上皮细胞(GES-1细胞)氧化应激模型的保护作用,旨在为葛根提取液对XO抑制作用和氧化应激保护方面的应用提供实验依据。……
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