谢圆媛，胡海峰，赵 莉，薛 鹏

近年来，肺癌的发病率逐年上升，已经成为最常见的恶性肿瘤[1]。我国肺癌的发病率及病死率均位居恶性肿瘤之首[2]。虽然针对肺癌的诊断和治疗方法不断改进，但其存活率并无明显提高，且临床预后效果差。PI3K/AKT信号通路在肿瘤的发生发展过程中起着重要作用[3]，能够促进细胞增殖和肿瘤转移，并抑制细胞凋亡，也与肿瘤的治疗及预后密切相关[4]。约90%的非小细胞肺癌细胞株存在PI3K/AKT信号通路的过度激活，以PI3K/AKT信号通路为靶标的新药研发越来越受到重视[5]。丙泊酚是临床上常用的麻醉药物，近年来有研究发现其具有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的作用[6]。本课题将探究丙泊酚能否通过PI3K/AKT信号通路对肺癌细胞的增殖、迁移与凋亡产生影响，并进一步探讨其作用机制，为临床上治疗肺癌提供新的实验依据。

1 材料与方法

1.1实验材料 人肺癌A549细胞株(CQH005)购自上海科学院细胞研究所。24只4～6周龄的雄性A/J小鼠(N000018)由延安大学医学院动物研究中心提供，实验动物许可证号：SCXK(陕)2019-003。丙泊酚购自上海源叶生物科技有限公司，RPMI-1640培养基、胎牛血清和Trizol试剂均购自美国Abcam公司，PrimeScriptTM1st Strand cDNA Synthesis试剂盒和TB GreenTMPremix Ex Taq Ⅱ试剂盒购自日本TaKaRa公司，Annexin V/PI细胞凋亡检测试剂盒购自南京诺唯赞生物科技股份有限公司，HE染色试剂盒和RIPA裂解液均购自北京索莱宝科技有限公司，PTEN、PI3K、p-AKT、AKT、mTOR、GAPDH多克隆抗体和山羊抗兔(鼠)IgG二抗均购自美国Cell Signaling Technology公司，PVDF膜购自美国Millipore公司。

1.2实验方法

1.2.1细胞培养：A549细胞用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基，置于37℃、5% CO2的培养箱中培养，传代时用0.25%胰蛋白酶进行消化，每2天更换1次培养基，以保证细胞生长所需的营养成分。……