溶藻弧菌PEPCK蛋白原核表达及其乙酰化、琥珀酰化修饰的鉴定
2021-06-23曾福源苏泽辉周诗慧谢妙庞欢瑛
生物技术通报 2021年5期
曾福源 苏泽辉 周诗慧 谢妙 庞欢瑛
(1.广东海洋大学深圳研究院,深圳 510000;2.广东海洋大学水产学院 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,湛江 524088)
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)作为糖异生过程中的一个关键代谢酶,催化草酰乙酸转变为磷酸烯醇式丙酮酸和二氧化碳,是几乎所有生物体糖异生中所必须的[1-2]。根据草酰乙酸无机磷酸盐供体的来源,PEPCK可分成ATP依赖性、GTP依赖性和PPi(inorganic pyrophosphate,PPi)依赖性 3 种类型[3-5]。该酶参与的代谢过程,在生物体血糖水平[6]、毒力调控[7]、抗病毒[8]。等方面均具有十分重要的作用,在不同生物的碳代谢中也具有不同的生理作用[9]。此外,还能刺激机体产生免疫反应,是一种很好的疫苗候选分子[10-11]。
蛋白质乙酰化是一种常见的翻译后修饰方式,参与转录、新陈代谢、趋化作用、细胞信号转导等多个生物学过程,并发挥着关键的调控作用[12]。乙酰化通过多种机制调节代谢酶活力,对代谢具有广泛的调控功能[13]。乙酰化修饰代谢酶可对糖酵解和糖异生代谢方向进行调控,如增加GapA(磷酸脱氢酶)的乙酰化程度可以增强菌体糖酵解活性,同时降低葡萄糖新生的能力[14]。在鼠伤寒沙门菌中,蛋白质乙酰化修饰参与了细菌毒力的调控及其体外诱导株耐药性的产生[15-16]。
蛋白质赖氨酸琥珀酰化是琥珀酰基供体通过酶学或非酶学的方式将琥珀酰基团共价结合到赖氨酸残基的过程[17],是近年来颇受关注的一种翻译后修饰。……
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