柱状田头菇遗传转化体系启动子的筛选
2021-06-23崔祥华陶南程波普赵永昌陈卫民李靖
崔祥华 陶南 程波普 赵永昌 陈卫民 李靖
(1.西南林业大学生命科学学院,昆明 650224;2.云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所,昆明 650223)
随着食用真菌遗传体系的深入研究与建立,越来越多的启动子被用于表达体系,寻找适合于不同菌类的启动子,对于构建高效的表达体系十分必要。目前,研究者对食药用菌中的多个启动子进行了克隆和序列分析,如香菇Lentinula edodes和草菇Volvariella volvacea中ras(ras gene)启动子、香菇和灵芝Ganoderma lucidum中gpd(glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase)启动子、双孢菇Agaricusbisporus中spr1(serine proteinase gene)启动子、cel1(tryptophan synthetase gene)启动子和cel3启动子、香菇 gal1(glu-coamylase gene)启动子等[1-5]。目前,真菌着力于选择使用强启动子和同源启动子,以增强靶标基因的表达量,而同源启动子能识别调控因子,降低甲基化频率,提高其转化效率[6]。但也存在一些异源启动子活性较强的现象,如研究者利用蝉棒束孢菌Isaria cicadae内源gpd、tef(translation elongation factor)和组蛋白(histone)H3启动子分别与来自稻瘟病Magnaporthe grisea的H3和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase)sod基因启动子进行比较,发现稻瘟病H3启动子起始转录活性更强[7]。因此,选择高效、适宜的启动子对于研究其功能基因过量表达有着重要意义。目前为止,研究者对香菇[8]、双孢菇[9]、金针菇 Flammulina velutipes[10]、平菇 Pleurotus ostreatus[11]、灵芝[12]等主要食药用菌都使用gpd启动子构建遗传转化体系,其它启动子用于表达体系的研究较少。
柱状田头菇(Cyclocybe aegerita),又称茶树菇[13],是一种温带至亚热带地区春秋季生长的广温型木腐性食用菌,在国内外有着广泛的种植。目前为我国的第九大类食用菌种植菌类,当前可开发的十大珍稀食用菌之一[14]。随着柱状田头菇遗传发育及育种研究的深入,需要建立高效稳定的遗传转化体系,以满足其遗传及性状等方面解析的需要。……
