曾迪藩，钟梅，李卫，王其友

周围神经损伤是一种威胁人类健康的常见神经系统疾病［1］，它对轴突和神经元具有直接和破坏性作用，并继发神经炎症，氧化应激，细胞凋亡和反应性神经胶质增生。有效治疗周围神经损伤的关键是损伤神经的轴突功能的修复，损伤远端的效应器官的恢复支配。而目前诸如精细手术、神经移植、全身抗炎治疗的治疗结局并不能令人满意。

干细胞移植是外周神经损伤治疗的有效策略之一，先前的研究表明BMSCs可以通过调节微环境来促进结构和运动功能的恢复，并促进神经发生和轴突延长［2］。然而，由于其低存活率和免疫原性，直接移植到受损组织的BMSCs治疗效果有限。最近的研究发现干细胞的治疗效果主要与其旁分泌活性密切相关［3］，这为外周神经损伤之后的干细胞治疗开辟了新的思路。

外泌体直径在40～150 nm，源自多囊泡内涵体，来源于几乎所有细胞类型。作为BMSCs旁分泌的载体，BMSC-EXOs携带可溶性因子、脂质、蛋白质和核酸，促进细胞间通讯并调节多种生理功能［4］。因此，我们假设BMSC-EXOs可以促进轴突再生治疗坐骨神经损伤，据此设计实验以探索BMSC-EXOs对神经细胞的调控作用，并通过检测轴突再生检验对坐骨神经损伤的修复作用。

1 材料与方法

1.1 细胞培养

1.1.1 大鼠BMSCs的分离与培养 所有涉及动物的实验程序均已获得中山大学动物保护和使用委员会的批准，实验动物（SD大鼠）饲养在（22±3）°C和光照/黑暗12小时轮替，充足的水和食物喂养。在无菌条件下分离Sprague-Dawley（SD）大鼠的股骨和胫骨，在无菌PBS缓冲液中洗涤并转移到在含有10%FBS的DMEM液培养皿中。……