郭中州，张亚南，刘季晨，郭志刚

南方医科大学南方医院心血管内科，广州 510515

动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是一种慢性炎症性疾病[1]，降脂联合抗炎治疗可降低其主要心血管事件的发生率[2-3]。研究证实，巨噬细胞在AS的炎症反应过程中扮演了重要角色[4]。本课题组前期研究结果显示，过表达脯氨酸/丝氨酸丰富的卷曲螺旋蛋白1(proline/serine-rich coiled-coil protein 1，PSRC1)可通过抑制巨噬细胞的炎症反应延缓AS的进展[5]。PSRC1是由PSRC1基因编码的一种微管结合蛋白，其中一端可与发挥细胞支撑作用的微管蛋白结合以维持细胞骨架的稳定性，但仅存在于胞质内，且其影响巨噬细胞炎性因子释放的确切分子机制国内外均未见报道。因此，本课题组提出PSRC1的另一端与细胞内某种其他蛋白结合而抑制炎症反应，进而发挥抑制AS作用的假设，以寻找影响巨噬细胞炎症反应的新靶点，为防治AS提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 主要材料 小鼠巨噬细胞R AW264.7购自中国典型培养物保藏中心。重组腺病毒载体Ad-PSRC1、Ad-GFP及Ad-shANXA2由和元生物技术(上海)有限公司构建；ox-LDL购自广州奕源生物科技有限公司，ANXA2单克隆抗体购自研如玉(广州)生物科技有限公司，DAPI染色液购自上海碧云天生物科技有限公司，RNA提取试剂Trizol及反转录试剂盒购自日本TaKaRa公司，RT-PCR引物购自生工生物工程(上海)股份有限公司，DMEM培养液、胎牛血清(FBS)、胰酶购自美国Gibco公司，PBS购自美国Thermo Scientific公司；离心管、EP管购自美国Axygen公司；细胞培养瓶、培养皿购自美国Corning公司；牛血清白蛋白(BSA)、油红O染料购自美国Sigma公司；二甲基亚砜(DMSO)购自美国Biosharp公司；……