王亚楠，陈昌国

1河北北方学院医学检验学院，河北张家口 075000；2解放军总医院第六医学中心检验科，北京 100048

自聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)技术发明以来，分子检测技术被广泛应用于疾病诊断、个体化诊疗、遗传分析等领域[1-3]。目前一代PCR、荧光定量PCR及新兴的数字PCR技术均需要专用仪器的支持以完成检测，在一些没有专用仪器的场景不能很好地发挥核酸检测的作用。20世纪90年代初，有学者尝试研发不依赖于复杂升降温仪器的核酸恒温扩增技术，其简化的扩增条件在很大程度上降低了对复杂仪器的依赖，为资源匮乏地区及实验室外的现场检测提供了新的技术手段。作为核酸恒温扩增的重要一员，重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification，RPA)技术曾被认为可替代PCR技术。本文就RPA的相关研究进展进行综述。

1 核酸恒温扩增技术简述

目前已研发出的核酸恒温扩增技术有环介导恒温扩增(loop-mediated isothermal amplification，LAMP)、链替代扩增(strand displacement amplification，SDA)、滚环扩增(rolling circle amplification，RCA)、依赖解旋酶的恒温基因扩增(helicase-dependent isothermal DNA amplification，HDA)、转录依赖的扩增系统(transcription-based amplification system，TAS)、依赖核酸序列的扩增(nuclear acid sequence-based amplification，NASBA)、转录介导的扩增(transcription mediated amplification，TMA)、RPA等。不同核酸扩增技术的特点及优缺点如表1－2所示。

表1 不同核酸恒温扩增技术的特点Tab.1 Characteristics of different techniques for nucleic acid isothermal amplification

表2 不同核酸恒温扩增技术的优缺点Tab.2 Merits and demerits of different techniques for nucleic acid isothermal amplification

RPA由英国TwistDx Inc公司于2006年成功开发[4]。虽然RPA恒温扩增法创立较晚，但其发展速度较快。与其他恒温扩增技术相比，R PA可在23～45 ℃条件下进行扩增反应，最适温度为37～42 ℃，不需要热变性，在常温下即可完成扩增过程，核酸扩增速度较快，可在20 min内获得目的扩增产物，并且不需要温控设备，可真正实现便携式快速核酸检测。……