雷家秀，朱雅萍，张 雨

(郑州市第七人民医院 麻醉科，河南 郑州 450000)

脓毒症(sepsis)是一种由感染引起的全身性炎性反应综合征，可导致多器官功能障碍，尤其是心血管系统。常常导致心肌受损、收缩力减弱和心舒张功能障碍，严重影响心脏功能。目前尚无有效的治疗方法。依托咪酯(etomidate，Eto)是咪唑类衍生物，由于其起效快、安全性高、对心血管和呼吸系统影响轻微等优点，是临床常用的麻醉诱导剂之一。Eto具有降低机体氧化应激水平及炎性反应，对脓毒症机体具有保护作用[1-3]。miR-290-5p是miR-290-295簇的成员之一，异丙酚通过上调脓毒症大鼠miR-290-5p的表达减轻脓毒症引起的急性肾损伤[4]。但Eto能否通过调控miR-290-5p表达，减轻脓毒症心肌损伤尚未可知。本研究初步探讨Eto对脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的心肌细胞损伤的影响及分子机制，为防治脓毒症心肌损伤提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

大鼠心肌细胞系(rat myocardial cell line H9C2,H9C2)(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库)；DMEM培养基、胎牛血清和青链霉素溶液(Hyclone公司)；脂多糖(Sigma-Aldrich公司)；依托咪酯(纯度≥99.8%)(中国食品药品检定研究院)；四甲基偶氮唑蓝(MTT)细胞活力检测试剂盒、膜联蛋白异硫氰酸荧光素(annexin V-FITC)细胞凋亡检测试剂盒、Trizol试剂和RIPA裂解液(北京索莱宝生物科技公司)；肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量ELISA检测试剂盒(R&D Systems公司)；miR-290-5p模拟物(miR-290-5p mimics)、miR-290-5p抑制物(anti-miR-290-5p)、模拟物阴性对照(miR-con)、抑制物对照(anti-miR-con)以及PCR引物(北京华大基因公司)；兔抗cleaved-caspase-3抗体、兔抗cyclinD1抗体以及山羊抗兔IgG(Cell Signaling Technology公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞的分组及处理:用含10%胎牛血清和1%青链霉素溶液的DMEM培养基培养H9C2细胞。……