付海洋 于浩, 李敏, 姜爱莉 付步芳 王召旭

0 引言

透明质酸(hyaluronan，hyaluronic acid，HA)最早应用于眼科手术、骨科手术，预防术后粘连以及起到缓释作用的药物载体等方面[1]。交联修饰之后的 HA通过提高分子量、改变水溶性、延长降解时间从而提高其临床效果[2]。交联后的成品因低免疫原性、较高安全系数、美容效果好、可在机体完全降解且不良反应发生概率低等优势，近年来在注射整形行业备受关注[3-4]。常见的交联剂有二乙烯基砜(divinyl sulfone,DVS)[5]和1，4丁二醇二缩水甘油醚(1,4-butanediol diglycidyl ether ，BDDE)[6]。其中BDDE交联剂因毒性较小、反应性好等优势，在整形手术用交联透明质酸钠凝胶中的应用十分广泛，然而它却具有易突变、易引起临床不良反应，以及致癌的潜在因素，因此其交联透明质酸中交联剂含量过高同样存在一定的安全性问题。BDDE的限量是BDDE-HA凝胶产品质量控制的关键指标之一，行业标准YY/T 0962—2014中规定BDDE交联剂含量不得高于2 μg/g。

现行的YY/T 0962—2014《整形手术用交联透明质酸钠凝胶》行业标准推荐使用酶标仪检测法和气相法对BDDE交联剂含量进行测定。但在常规的气相法中，由于交联透明质酸钠凝胶产品大多都是颗粒化物质，BDDE交联剂可能会残留在颗粒内部，会对检测结果造成干扰。在常规的酶标仪检测法中，由于对样品进行酶解所采用的透明质酸酶分子结构也含有环氧结构，会对检测结果造成假阳性的影响，因此需要排除透明质酸酶的干扰作用。

基于上述分析，本文提出：针对气相法首先采用透明质酸酶将样品酶解，并用有机溶剂乙酸乙酯进行萃取，将处理后的样品与2 μg/mL对照品溶液进行峰面积比较；……