刘晓华（平顶山市第一人民医院血液科检验室，河南 平顶山467000）

免疫性血小板减少性紫癜（ITP）是与免疫因素相关的一种临床常见的出血性疾病，其中，紫癜为其最常见的体征。大量研究证实，ITP与机体免疫功能密切相关，其中T细胞亚群起到关键作用［1］。近年来，国外相关研究表明，ITP患者自然杀伤细胞（NK细胞）和细胞凋亡均存在明显异常［2］。国内关于这方面研究较少，鉴于此，本研究旨在探究外周血CD4+CD25+Treg、CD3+、NK+Caspase-8+在免疫性血小板减少性紫癜（ITP）患者中的检测意义。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年10月～2020年1月我院收治的30例ITP初诊患者设为观察组，所有患者均符合ITP诊断标准［3］，且无其他自身免疫性疾病干扰研究结果。同期纳入30例健康志愿者设为对照组。观察组中男16例、女14例；年龄25～75（46.89±6.57）岁。对照组中男16例、女15例；年龄20～70（45.75±6.34）岁。

1.2 方法

1.2.1 研究试剂及仪器 采用美国Becton Dickin⁃son公司出品：异硫氰酸荧光粉（FTTC）标记的鼠抗人CD4单克隆抗体、藻红蛋（PE）标记的鼠抗人CD25单抗。Bioscience公司出品抗人CD3-PE-Cy5选择美国Becman Coutler公司出品的EPICS XL型流式细胞仪及EPICS Q-PREP溶血仪。

1.2.2 检测方法 30例ITP患者及30例健康者均于清晨取2mL空腹静脉血于干燥试管中，加20uL FTTC-CD4单克隆抗体、20uL FTTC-CD25单克隆抗体及10uL抗人CD3-PE-Cy5，再加入EDAT抗凝全血100ul混合均匀，避光20min，随后加1ml溶血素，避光10min后，以1 500r/min离心5min，弃上清液，剩余液体中加入0.5ml PBS液，进行检测。每个样本取10000个细胞，用流式细胞仪检测样本中CD4+CD25+Treg、CD3+表达率。取EDAT抗凝全血2ml，使用FICOLL液分离出单个核细胞，并制成1×106个/uL悬浊液，检测NK+Caspase-8+水平。同时取空腹静脉血测定患儿血常规，定期复查。

1.3 临床观察指……