李国涛 朱豫萌 张 盼 张国强

快速增殖原发性肝细胞癌的主要生物学特征之一,是导致患者预后差的重要原因。研究肝细胞癌细胞快速增殖的机制对改善患者预后具有重要的临床意义。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类不编码蛋白的RNA，广泛存在于真核生物中，其作用是调控基因表达。了解lncRNA的基因调控方式，研究疾病发生机制，为临床治疗有望提供新的靶点[1-2]。目前lncRNA成为研究癌症发病机制的热点，本文研究肝细胞癌组织以及肝细胞癌患者血清中lincRNA-UFC1的表达水平，以期为临床诊断、指导治疗提供参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象

2016年1月至2019年1月，选择在医院治疗的原发性肝细胞癌患者的68例的石蜡标本进行研究，其中男性52例，女性16例，年龄43～71岁，平均(54.9±8.1)岁。所有患者均经病理证实为肝细胞癌；Edmondson分级：Ⅰ、Ⅱ级16例，Ⅲ、Ⅳ级52例；BCLC分期：A期48例，B期13例，C期5例，D期2例；手术治疗，术前未进行其他相关治疗。本研究经过医院医学伦理委员会同意。

1.2 检测方法

应用原位杂交的方法检测68例肝细胞癌组织以及其相对应的癌旁组织中lincRNA-UFC1水平的表达。肝细胞癌组织脱水、浸蜡、包埋，切片5 μm。石蜡经二甲苯、梯度酒精脱蜡水化，切片置入3% H2O2中10 min，灭活内源性过氧化物酶，无菌蒸馏水洗涤3次。暴露lncRNA核酸片段，后固定，预杂交，杂交，洗涤，加封闭液，滴加生物素标记的鼠抗地高辛，滴加SABC，滴加生物素化过氧化物酶，DAB显色，苏木精染核，梯度酒精脱水，二甲苯透明，封片，显微镜下观察。染色强度判断：0分为无色，1分为淡黄色，2分为棕黄色，3分为棕褐色；……