基于NLRP3炎性小体探讨芍药甘草汤对神经根型颈椎病大鼠的抗炎镇痛机制
2021-06-10杨芳洁吴大伟
杨芳洁,吴大伟,何 坚*
(1.福建中医药大学康复医学院,福建 福州350122;2.江苏省盐城市中医院,江苏 盐城224000)
颈椎病是一种与年龄有关的常见颈椎退行性疾病[1],我国颈椎病的患病率为17.3%,其中神经根型颈椎病(cervical spondylotic radiculopathy,CSR)占60%~70%[2]。该病的主要临床表现为神经根性痛,炎症介质是诱发CSR疼痛的关键因素[3]。最新研究报道,NLRP3炎性小体的合成与释放在神经根性疼痛中具有重要作用[4]。芍药甘草汤可柔肝益脾、通顺血脉、缓急止痛,是治疗痉挛疼痛的良方。本团队前期研究证明芍药甘草汤对于治疗颈椎病有效[5-6],但芍药甘草汤治疗急性期CSR的作用机制尚未明确。本研究采用“椎管插线法”建立急性期CSR大鼠模型[7],探讨芍药甘草汤对CSR模型大鼠的可能作用机制,为芍药甘草汤临床疗效的科学内涵以及进一步推广提供实验依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 60只健康成年的SPF级SD大鼠,鼠龄6~8周,体质量200~250g,于福建中医药大学实验动物中心饲养,许可证号:SYXK(闽)2012-001。
1.2 实验药物 芍药甘草汤药物组成:白芍12g,甘草12g,购自福建中医药大学附属康复医院中药房的颗粒剂(江阴天江药业有限公司)。
1.3 实验试剂 苏木素伊红染液(北京索莱宝公司);rat IL-18 Elisa Kit(上海西唐生物公司);Anti-NLRP3 antibody(英国艾博抗公司)。
1.4 实验仪器 YB-6LF生物组织石蜡包埋机(湖北阳光科技有限公司);RM2235石蜡切片机(德国Leica公司);BH-2德国光学显微镜(日本奥林巴斯公司);Tecan M200 PRO多功能酶标仪(瑞士Tecan公司);Leica DM4000B荧光显微镜(德国Leica公司);ChemiDocXRS+System超高灵敏度化学发光成像系统(美国Bio-Rad公司);BioSpec 70/20USR小动物核磁成像系统(美国BRUKER公司)。
2 实验方法
2.1 模型制备及分组 将大鼠分为假手术组(n=12)和造模组(n=48),适应性喂养1周后参照文献[7]对造模组大鼠进行造模,术后予注射庆大霉素防止局部感染。……
