基于TLR4/NF-κB信号通路研究甘草泻心汤治疗溃疡性结肠炎大鼠的机制
2021-06-10张建伟陈桥英
张建伟,陈桥英,陈 仪
(福建中医药大学中医学院,福建 福州350122)
溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种原因不明的慢性炎症性肠道疾病,随着社会快速发展、生活方式及饮食结构的改变,在我国的发病率逐年上升,发病率最低估算约为11.60/10000[1]。研究发现TLR4/NF-κB是溃疡性结肠炎的重要信号通路之一,TLR4与炎症和免疫息息相关,NF-κB作为TLR4信号通路下游重要的多功能核转录因子,激活后在机体的炎症、免疫反应、细胞凋亡等过程中起枢纽作用。因此本文旨在通过对TLR4/NF-κB炎症通路的深入研究,探讨甘草泻心汤对UC的作用机制。
1 实验材料
1.1 实验动物 清洁级Wistar雄性大鼠42只,体质量200 g左右,鼠龄8周,购自上海斯莱克实验动物有限责任公司,许可证号:SCXK(沪)2017-0005,饲养在福建中医药大学实验动物中心SPF级实验室。
1.2 实验药物 甘草泻心汤[2]按原方比例:生甘草12g,半夏9g,干姜9g,黄芩9g,黄连3g,人参9g,大枣6g,购于福建中医药大学附属第三人民医院。柳氮磺吡啶肠溶片(上海福达制药有限公司)。
1.3 实验试剂 2,4-二硝基氯苯、水合氯醛(上海阿拉丁生化科技股份有限公司);无水乙醇、丙酮、冰乙酸(西陇化工股份有限公司);过氧化氢(国药集团化学试剂有限公司);液体石蜡、苏木素伊红(北京索莱宝科技有限公司);硫化钠(天津恒兴化试剂发展有限公司);无菌PBS缓冲液(美国HyClone公司);生理盐水(福州海王福药制药有限公司);白介素-6(IL-6)、IL-8 ELISA试剂盒(江苏酶免实业有限公司);IL-10 ELISA试剂盒(美国R&D公司);NF-κB p65(Ab-536)Antibody、TLR4 Antibody(美国Signalway Antibody)。
1.4 实验仪器 RM2135切片机、LeicaDM400B显微图像采集系统、生物显微镜(德国Leica公司);64R型低温高速离心机(美国BECKMAN公司);……
