补阳还五汤对高脂血症模型大鼠FAK-PI3K-AKT信号通路的作用影响*
2021-06-09卞敬琦张玉昆冯月男牛雯颖
卞敬琦,张玉昆,冯月男,牛雯颖
(黑龙江中医药大学实验实训中心,哈尔滨 150040)
高脂血症是诱发动脉粥样硬化、血栓的主要因素,严重威胁人类健康。血脂异常可损伤血管壁内皮细胞,促使血小板黏附、聚集和释放,从而引起血小板活化。补阳还五汤具有抗动脉粥样硬化、改善血流动力学、降血脂、抗血小板活化等作用,至今已沿用百年,是治疗卒中之气虚血瘀证的名方。磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号通路广泛调控细胞功能,有报道显示,抑制Class IA PI3K信号通路可明显降低小鼠游离脂肪酸(FFA)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平[1],故本实验以黏附斑激酶(FAK)-PI3K-AKT信号通路为切入点,对补阳还五汤对高脂血症模型大鼠作用机制进行研究,以期探讨潜在作用靶点,为中医药治疗高脂血症提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1动物
选取清洁级健康SD大鼠50只,雄性,体重(235.4±10.6)g,由哈尔滨医科大学实验动物中心提供(合格证号SCXK(黑)2013-001)。
1.1.2药品与试剂
补阳还五汤药物组成:黄芪120 g,归尾6 g,赤芍5 g,地龙3 g,川芎3 g,桃仁3 g,红花3 g;辛伐他汀片购自哈药集团三精明水药业有限公司(批号:201706001,规格:10 mg);TC、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、TG试剂盒均购自南京建成生物工程研究所(批号:182022、180671、187831);全蛋白提取试剂盒、二喹啉甲酸(BCA)蛋白浓度测定试剂盒、一抗二抗去除液、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶快速制备试剂盒、Western洗涤液、SDS-PAGE电泳液(干粉)、SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液、电化学发光(ECL)液、FAK、Syk、磷酸化蛋白激酶B[p-AKT(Ser473)]、磷脂酰肌醇激酶β抗体(PI3Kp110β)、羊抗兔IgG-辣根过氧化物酶(HRP)、内参抗体均……
