杨贤慧，方霞，刘爱胜，施俊柱

(1.深圳市龙华区人民医院 检验科，深圳 518109；2.深圳市龙华区中心医院 检验科，深圳 518110)

卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)又称早绝经，是指曾经月经周期正常的女性在40岁前出现原因不明的卵巢功能衰竭，主要表现为卵巢萎缩性持续闭经，并伴有雌激素水平降低而促性腺激素水平升高[1-3]。POF病因十分复杂，发病机制目前尚未完全明确，多数认为POF发病与遗传、环境、精神、感染、代谢及自身免疫等诸多因素有关，其中遗传因素是POF发病的主要原因之一[4-5]。近年研究发现，POF发病与多个基因多个位点多态性有密切关系，TNF-α基因308G/A位点多态性就是其中之一，且其基因突变可影响某些细胞因子和蛋白的表达水平，从而参与POF疾病的发生和发展[6-8]。因此，本研究对深圳地区167例POF患者和120例非POF健康育龄妇女TNF-α基因308G/A位点多态性与TNF-α、TGF-β1水平之间的相关性进行了调查分析。

1 材料与方法

1.1 研究对象选取2017年4月—2019年5月来深圳龙华区人民医院妇产中心就诊并确诊为POF患者167例，年龄(28.06±9.57)岁。纳入标准[7]：(1)年龄<40周岁，继发性闭经时间>6个月；(2)2次或以上血清卵泡刺激素(follicle stimulating hormone，FSH)≥40 U/L或黄体生成素(LH)>30 U/L(间隔1个月以上)；(3)连续2次雌二醇(estradiol，E2)水平<91.5 pmol/L(2个月内)；(4)B超显示双侧卵巢萎缩，无卵泡发育[7]。排除因其他原因如染色体核型异常、自身免疫性疾病、盆腔手术史及放化疗史等卵巢损害的因素导致卵巢功能低下的患者。同时选择同期非POF健康育龄妇女120例，年龄(29.36±10.24)岁，均为因输卵管或男性不育因素而就诊的育龄期妇女，月经周期规律，激素水平、染色体核型、子宫及卵巢功能均正常，排除有卵巢手术史、放化疗史、其他自身免疫性疾病、激素水平紊乱史及重大疾病史的患者。确保两组妇女的年龄差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会同意批准，且所有患者及家属对研究内容知情并签署知情同意书。

1.2 仪器与试剂ABI7500 PCR分析仪、Qubit4.0核酸蛋白定量仪由美国ABI公司提供；DNA提取试剂由深圳亚能生物技术有限公司提供；TNF-α和TGF-β1试剂盒由深圳市科润达生物工程有限公司提供；AE275全自动免疫分析仪由深圳爱康科技有限公司提供。

1.3 方法

1.3.1 标本采集 清晨采用一次性采血针采集所有研究对象空腹静脉血2份，其中一份3～4 mL于无抗凝剂的干燥管内分离血清，用于TNF-α和TGF-β1水平测定；另……