朱莉萍，贾春敏，陈南山

(1.武汉市金银潭医院 ICU，武汉 430040；2.武汉市金银潭医院 内科，武汉 430040；3.武汉市金银潭医院 结核科，武汉 430040)

结核分枝杆菌是结核病的致病菌，人体感染结核分枝杆菌后，大多数感染者处于潜伏状态，约有5%的感染者出现临床症状，这种差异主要是由宿主的免疫力不同引起的[1]。当结核分枝杆菌经呼吸道进入肺组织时，肺泡中的巨噬细胞将通过吞噬作用控制或消除结核分枝杆菌的感染[2]。巨噬细胞表达的PRR在上述过程中具有重要作用，如细胞表面的TLR和细胞内的核苷酸结合寡聚化结构域样受体(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor，NLR)[3-4]。核苷酸结合寡聚化结构域2(nucleotide binding oligomerization domain 2，NOD2)是NLR家族的成员。研究发现，NOD2可通过诱导一氧化氮和抗菌肽防御素4B的分泌参与人肺泡巨噬细胞抗结核分枝杆菌感染的免疫过程[5]。鉴于炎症反应[6]和自噬[7]在巨噬细胞的免疫过程中具有重要作用，本研究利用人巨噬细胞U937对结核分枝杆菌的吞噬能力，试从炎症反应、自噬角度分析NOD2基因在巨噬细胞抗结核分枝杆菌免疫反应中的作用。

1 材料与方法

1.1 样本来源及分组人巨噬细胞U937购自上海子实生物科技有限公司，结核分枝杆菌购自上海恒斐生物科技有限公司。以受结核分枝杆菌感染的U937细胞为感染组， 以未经结核分枝杆菌感染的U937细胞为对照组。

1.2 试剂与仪器Lipofectamine 3000转染试剂盒购自Invitrogen公司，反转录试剂盒购自GeneCopoeia公司，引物由苏州泓迅生物科技股份有限公司合成，ELISA试剂盒购自南京森贝伽生物科技有限公司，蛋白一抗IL-6兔多克隆抗体、IL-8兔多克隆抗体、TNF-α抗体购自Proteintech公司。……