李泓町，高丽萍

(1. 重庆市中医院 肝病科，重庆 400021；2.重庆市中医院 肿瘤科，重庆 400021)

肝癌是发生于肝脏的恶性肿瘤，包括原发性肝癌和转移性肝癌2种，较常见的是原发性肝癌。接受手术治疗的肝癌患者通常具有高复发率，这可能是导致患者五年总体生存率较低的原因之一[1]。因此，需要充分了解肝癌发生和进展的分子机制，以找到新的靶点来改善肝癌的临床治疗效果。研究发现，miRNA在肝癌发生和进展中发挥重要的生物学作用[2-3]，这为肝癌的治疗提供了新的见解。一些研究发现，miR-30e-5p在许多人类肿瘤中表达下调，包括结直肠癌、非小细胞肺癌和乳腺癌等[4-6]。一项研究对与原发性肝癌早期诊断相关的miRNA进行了筛选，发现miR-30e-5p在肝癌中呈低表达[7]。然而，miR-30e-5p在人类肝癌中的生物学作用及机制尚不明确。研究发现，在肝癌组织中自噬相关基因5(autophagy-related gene 5，ATG5)的表达水平明显升高，与肝癌的发病及进展密切相关[8-9]。本研究前期通过生物信息学软件预测发现，miR-30e-5p与ATG5基因3＇非翻译区(untranslated region，UTR)存在靶向结合位点，提示miR-30e-5p可能通过调控ATG5基因的表达影响细胞生物学行为。因此，本研究探讨miR-30e-5p对肝癌细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其可能的分子机制，以期为肝癌的诊断和治疗提供新的靶点。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂人正常肝细胞HL-7702及人肝癌细胞MHCC97H、Huh7、HCCLM3购于中国科学院上海细胞库；FBS、脂质体Lipofectamine 2000转染试剂盒购于Invitrogen公司；DMEM培养液购于Hyclone公司；青霉素-链霉素双抗购于北京雷根生物技术有限公司；MTT购于Sigma公司；miR-30e-5p mimics及对照mimics-NC购于上海吉玛制药技术有限公司；……