王成，金卫东，郭长磊，李霞，刘振，韩明磊，侯永兰，崔佳佳

(1.新乡市中心医院 心血管内一科，新乡 453000；2.新乡医学院第一附属医院 心血管内科，新乡 453000)

心血管系统疾病，如心力衰竭、心肌缺血再灌注损伤、冠状动脉微栓塞等常常伴有心肌组织炎症反应，严重威胁着人们的健康及生命。TNF-α是机体内关键的炎性因子，促进心力衰竭、动脉粥样硬化等心血管系统疾病的发生发展，诱导心肌细胞损伤[1]。具体而言，心肌组织中高水平的TNF-α可诱导心肌细胞损伤，促进细胞凋亡，破坏心肌组织结构[2]。髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88，MyD88)可激活NF-κB，引起其高表达，释放一系列炎症介质，破坏心脏局部免疫平衡，最终引起炎性因子的大量释放，触发炎症反应，致使心肌细胞凋亡等[3]。已有研究表明，MyD88 敲除小鼠在肾脏和心肌缺血再灌注过程中由炎症反应导致的组织损伤和脏器功能紊乱明显减轻[4]，沉默MyD88可抑制IEC-6细胞凋亡改善肠道炎症性疾病病情[5]，故推测沉默MyD88表达可有效改善心肌炎症。目前还没有有关沉默MyD88对TNF-α诱导的心肌细胞炎症反应相关研究，本研究以此为切入点探究沉默MyD88抑制NF-κB p65活化对TNF-α诱导的心肌细胞凋亡和炎症损伤的影响。

1 材料与方法

1.1 实验试剂DMEM培养液、青-链霉素、FBS和胰蛋白酶，购自Gibco公司；shRNA-MyD88慢病毒及对照慢病毒shRNA-NC，购自上海吉玛制药技术有限公司；5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2′-deoxyuridine, BrdU)细胞增殖检测试剂盒、BCA蛋白浓度测定试剂盒、Annexin Ⅴ-FITC细胞凋亡检测试剂盒，购自碧云天生物技术研究所；肌酸激酶同工酶MB(creatine kinase MB，CK-MB)测试盒、肌红……