金蕾，史伟峰（.无锡市妇幼保健院检验科，江苏无锡4000；.苏州大学附属第三医院检验科，江苏常州3000）

外阴阴道念珠菌病（vulvovaginal candidiasis，VVC）是一种临床常见妇科疾病，感染率仅次于细菌性阴道炎，极大地影响妇女生殖健康［1］。白念珠菌是该病常见的致病菌，感染率约为80%［2］。唑类药物是目前临床治疗VVC的首选药［3］，但随着唑类药物的广泛使用，耐药菌株日益增多。减少以及预防耐药株的出现，已经成为医学领域的研究热点。唑类药物通过抑制14-α去甲基酶，从而抑制麦角甾醇合成，破坏真菌细胞膜，从而发挥抗真菌作用［4］。目前，麦角甾醇合成通路中活性药物靶酶基因Ergosterol（简称ERG）的突变或者高表达，被认为是白念珠菌耐唑类药物的主要机制之一［5］。本研究旨在了解VVC患者白念珠菌的检出情况，并探究唑类药物耐药率及ERG5基因突变情况，为临床抗真菌药物的选择提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象及菌株 收集无锡市妇幼保健院2018年6—12月妇产科门诊VVC患者阴道分泌物共500例，患者年龄25～49岁。患者临床症状为外阴红肿瘙痒，分泌物增多，并且呈白色豆腐渣样。白念珠菌ATCC 10231购自于郑州安图生物公司。

1.2 主要仪器与试剂 PCR仪（美国ABI公司）；凝胶成像仪（上海复日科技公司）；电泳仪、电泳槽（北京六一仪器厂）；质谱仪（德国布鲁克公司）；真菌快速培养鉴定药敏试剂盒（郑州安图生物公司）；dNTP、10×PCR Buffer（含Mg2+）、Taq Plus DNA聚合酶、Ezup柱式基因组DNA抽取试剂盒、B600090 PCR扩增试剂盒（上海生工生物工程公司）。

1.3 真菌镜检及培养 将采集的阴道分泌物标本均匀涂抹于载玻片上，滴加50μL 10%KOH溶液，盖上盖玻片，加热固定，冷却后在显微镜下观察标本有无菌丝或者孢子。……