长链非编码RNA MEF2C-AS1对大鼠骨量的影响
2021-06-01彭启华王力刚赵玉驰
彭启华,王力刚,赵玉驰
(1.南华大学附属邵阳医院骨科, 湖南邵阳 422000; 2.南方科技大学盐田医院骨科,广东深圳 518000)
骨质疏松症(osteoporosis,OP)是以骨密度(bone mineral density,BMD)显著降低和骨折风险增加为特征的人类常见骨代谢疾病,且随着年龄增长发病率越明显[1]。SOST蛋白(sclerostin)是由人类17q12-21染色体上SOST基因编码的糖蛋白。肌细胞增强因子2C(myocyte enhancer factor 2C,MEF2C)是重要转录调节因子。Kramer等[2]发现,敲除小鼠MEF2C基因会导致SOST表达下降,从而使骨量和骨密度增加。因此,MEF2C-SOST转录轴的发现对于骨代谢疾病的治疗具有重要意义。慢病毒载体以其较高感染率和稳定基因表达已成为实验室常用转基因载体[3]。肌细胞增强因子2C-反义链1(myocyte enhancer factors 2C-antisense RNA1, MEF2C-AS1)是近年来新发现的lncRNA,基因位于5q14.3, 编码于MEF2C基因的反义链上,不仅可以调节正义转录本的表达水平,还可以反馈蛋白质和基因组水平。有研究发现MEF2C-AS1与股骨颈密度显著相关[4]。
课题组前期在细胞实验中,发现lncRNA MEF2C-AS1可以促进成骨细胞分化成熟,对机体骨量增加可能存在积极作用[5]。因此,本实验将构建大鼠骨质疏松动物模型,通过体内注射MEF2C-AS1慢病毒载体后检测骨组织形态计量学变化,进一步探讨MEF2C-AS1对机体骨量的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物
SD雌性大鼠46只,SPF级,体重180~220 g,购于湖南斯莱克景达实验动物公司;在湖南省药物安全评价研究及动物实验中心屏障环境C区饲养。动物使用得到动物实验中心伦理委员会批准,并按照《实验动物护理和使用指南》执行。
1.2 主要试剂和仪器
2%戊巴比妥钠购自德国Merck公司;青霉素购自华北制药股份有限公司;……
