唐凤祝，简洁，梁开如，罗刘衡，石艳艳，余绍兰，周琳琳，左凤琼，李婉宜*

宫颈癌是全球女性第四大常见癌症[1]，2020年新发宫颈癌病例60万(604 127)，其中近11万例在中国(109 741)；2020年因宫颈癌死亡病例数34万(341 831)，其中近6万例在中国(59 060)[2-3]。人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)持续感染是造成宫颈癌的主要原因。研究发现，宫颈癌患者的HPV感染率可高达99.7%[4-5]。致癌亚型HPV16和HPV18约占全球宫颈癌病例的70%[6]。本研究通过对21 776例女性进行HPV分型检测，并对其中3 540例患者进行宫颈液基细胞学检查(thinprep cytologic test，TCT)，了解四川省妇幼保健院门诊女性HPV感染率及亚型分布的变化，分析不同HPV亚型与宫颈细胞病变的关系，为降低高级别宫颈病变和宫颈癌的发生率提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2013年1月1日至2016年12月31日在四川省妇幼保健院妇科门诊部进行HPV检测的女性作为研究对象，共计21 776例，其中进一步行宫颈TCT检查的患者3 540例。就诊者年龄16～76岁，平均年龄为35.39岁，均有性生活史，所有就诊者知情同意，本研究获得四川省妇幼保健院伦理委员会的同意。

1.2 HPV检测

刷取宫颈脱落细胞标本，保存于已加细胞保存液的试管中。从含有宫颈细胞的细胞保存液中通过细胞裂解液(Hybribio Ltd，Guangdong，China)提取细胞总DNA。用HPV核酸检测试剂盒(Hybribio Ltd，Guangdong，China)对21种HPV亚型进行PCR测序以决定分型。扩增条件为：95℃预变性9 min，95℃变性20 s，55℃扩增30 s，72℃延伸30 s，72℃延伸5 min，共40个循环。同时设置阴性对照和阳性对照，以避免假阳性。杂交后，将扩增产物在95℃下加热5 min，然后冰浴处理2 min。与HHM-2(Hybribio Ltd，Guangdong，China)进行快速分子转移杂交后，共检出15种高危HPV(high risk HPV，HR-HPV)(16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66和68)和6种低危HPV(low risk HPV，LR-HPV)(6、11、42、43、44和81)。

1.3 TCT检测

用细胞刷收集宫颈脱落细胞，用ThinPrep Pap Test(Thermo Fisher Science，Shanghai，China)进行细胞学检查。……