魏域玲，温 彬，高建忠，陈再忠

(1.上海海洋大学国家水产科学实验教育示范中心，上海 201306； 2.上海海洋大学农业与农村部淡水水生遗传资源重点实验室，上海 201306； 3.上海水生动物遗传育种协同创新，上海海洋大学，上海 201306； 4.上海海洋大学上海市水产养殖工程研究中心，上海 201306)

七彩神仙鱼(Symphysodonharaldi)[1]隶属于鲈形目(Perciformes)慈鲷科(Cichlidae)，原产于亚马逊河流域，经人工驯养和繁殖成为最具观赏价值的热带观赏鱼之一[2]。七彩神仙鱼幼鱼会啄食亲鱼体表的粘液[3，4]，这种特殊的行为与哺乳动物的哺育行为非常相似。

同源异形框基因2(orthodenticle homeobox 2，otx2)[5,6]属otx家族[7]，其编码的蛋白质作为转录因子，在脑[8]、颅面和感觉器官发育中都发挥重要的作用[7，9-10]。同时，otx2还是影响多巴胺神经元产生的一个关键基因[8]，能够调节中脑基底盘的神经元产生的活性和多巴胺前体细胞的增殖及分化[11]。而多巴胺在哺乳动物中枢神经系统中有着极其重要的生理功能，包括运动的整合、认知、情感、奖赏、意识和记忆[11，12]。

本研究对七彩神仙鱼otx2基因全长进行克隆，验证并分析了该基因在不同组织中的表达，并在七彩神仙鱼脑组织中对该基因进行定位，旨在预测otx2基因在七彩神仙鱼亲代抚育过程中可能起到的作用，为了解七彩神仙鱼亲代抚育提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 实验材料

实验用鱼取自上海海洋大学滨海基地，选取六尾雌性七彩神仙鱼亲鱼，分别取脑、肌肉、性腺、皮肤、肝脏、心脏、肠道和肾脏组织，迅速置于液氮，-80 ℃保存。

1.2 方法

1.2.1 总RNA提取与cDNA的合成