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枯草芽孢杆菌产烟酰胺酶的发酵工艺条件优化

2021-05-29金如昌孟恒君濮梦华胡昊

安徽化工 2021年3期

金如昌,孟恒君,濮梦华,胡昊

(安徽瑞邦生物科技有限公司,安徽马鞍山243100)

烟酸(Nicotinic Acid,NA)也称作维生素B3,是一种可溶性维生素,人体必需的13种维生素之一,广泛存在于动物内脏、牛奶、鸡蛋以及新鲜蔬菜中。烟酸可用于饲料添加剂,以提高动物对饲料中蛋白质的利用率,促进动物的生长发育。此外,烟酸还是一种广泛的医药中间体,可以作为抗癞皮病和抗狗黑舌症的重要因子。

目前,合成烟酸的方法主要有氨氧化法、空气直接氧化法、电解氧化法、吡啶羟基化法。化学方法生产烟酸需要高温、高压等反应条件,环境污染大,生产效率低。随着生物工程技术的高速发展和日益严峻的环境要求,利用生物法合成烟酸符合目前绿色化学发展的趋势,通过将微生物发酵直接生产烟酸已成为最主要的方法,目前生产所用菌株主要有马红球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏菌。本公司研发部门前期通过紫外诱变和化学诱变筛选出枯草芽孢杆菌N-17,该菌株可以产生烟酰胺酶,经过摇瓶实验,证明该酶能够将烟酰胺转变为烟酸,转化率达97.8%~98.4%。

本研究对N-17菌株进行发酵工艺优化,通过考查不同发酵温度、pH值、添加不同碳氮源、不同金属离子等,确定枯草芽孢杆菌产烟酰胺酶发酵的最佳条件,为枯草芽孢杆菌后续产烟酸工业化生产条件奠定基础。

1 实验部分

1.1 试剂和仪器

菌株来源:枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),保藏编号为CICC10071,安徽瑞邦生物科技有限公司;所有试剂市购。

培养基配方:

活化斜……

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