白帅 杨露瑶 屈扬 李慧

2020年全球肺癌新发病例约220万，是全球发病率排名第二位的恶性肿瘤，为导致癌症死亡的首要原因，约占癌症总死亡人数的18%（约180万例）［1］。肺腺癌是肺癌最常见的病理类型［2］。早期肺癌多无明显症状，患者确诊时多已属晚期，5年生存率低。MicroRNAs（miRNAs）是一类长度约为18～25个核苷酸的非编码单链RNA，主要通过与靶基因mRNA的3'UTR区域结合，降解或抑制其翻译，从而参与细胞生长、增殖、分化及凋亡等方面的调控［3］。在肿瘤中异常表达的miRNA可以发挥抑癌或促癌的作用［4］。如miR-21在肺癌中高表达，并可以促进肿瘤的进展［5］，而miR-202和miR-27b可以抑制肿瘤的发展［6-7］。有报道miR-520c-3p可以在乳腺癌和肝细胞癌中发挥抑癌作用［8-9］，但在肺癌中的作用仍未明确。本研究旨在通过检测肺腺癌组织和细胞中miR-520c-3p的表达、生物学功能及靶基因，为肺腺癌的治疗提供新的潜在靶点。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 标本 本研究共纳入肺腺癌患者118例，标本来源于2010年2月至2015年1月天津医科大学肿瘤医院肿瘤生物样本库。患者病理学诊断明确。本研究获得本院伦理委员会批准。肿瘤组织及癌旁正常组织样本的基本信息见表1。

表1 118例肺腺癌患者及癌旁正常组织样本的基本信息

1.1.2 细胞与主要试剂 肺腺癌细胞系A549购自中国科学院细胞库；胎牛血清、RPMI-1640 购自美国Gibco公司；Trizol和LipofectamineTM2000购自美国In⁃vitrogen 公司；引物（miRNA-520c-3p、U6、Rab22a、GAPDH、双荧光素酶报告基因载体Rab22a 野生型及突变型）由上海生工公司合成；miRNA-520c-3p模拟物和阴性对照（miRNA-NC）购自广州锐博公司；逆转录及荧光定量检测试剂盒（SYBR Green）购自日本Takara 公司，Transwell 小室购自美国Corning 公司；……