邓嘉强 井秀娜 林淡钰 卜璐璐 陈颖 陶恩祥

帕金森病（PD）是常见神经退行性疾病，主要以黑质多巴胺能神经元的变性和路易小体的形成为病理特征。目前PD 确切的病因和发病机制尚不完全清楚，最近研究表明持续存在的免疫反应参与了帕金森病的发病机制［1］。神经炎症在死后PD 患者大脑中仍存有明显的病变特征，NLRP3炎症小体是PD 病理过程中发挥主要调控作用的炎症小体，异常聚集的α⁃syn 能激活NLRP3炎症小体诱发神经炎症，导致多巴胺能神经元变性、丢失［2］。因此，抑制NLRP3炎症小体的激活，可作为治疗PD 的重要方案。

有研究发现，在抑制PKR 活化后可以抑制NLRP3炎症小体的激活和IL⁃1β 的成熟和分泌［3］。利福平可通过抑制NLRP3炎症小体的激活来减轻小胶质细胞炎症毒性［4］，并且利福平可以抑制PERK⁃eIF2α⁃ATF4 通路缓解内质网应激保护多巴胺能神经元［5］。PKR 与PERK 都是eIF2α 系列分子，siRNA 靶向PERK 能抑制PKR 活化［6］。因此，我们猜测利福平能通过抑制PKR 活化减轻神经炎症发挥神经保护作用。为进一步验证利福平抑制PKR 活化缓解神经炎症，我们观察了利福平对鱼藤酮诱导下BV2细胞内p⁃PKR、Caspase⁃1、NLRP3、IL⁃1β 等蛋白的表达水平的影响，进一步探索了利福平抑制神经炎症发挥神经保护作用的相关机制，旨在为帕金森病的治疗和预防提供新的靶点。

1 材料和方法

1.1 试剂和材料 DMEM 培养基、D/F12 培养基、胎牛血清、胰蛋白酶购自Gibco 公司；Rotenone 购自美国APExBio 公司；Rifampicin 购自美国Sigma 公司；C16（PKR 抑制剂）购自美国Merck⁃Millipore 公司；兔抗PKR 抗体购自美国艾菲公司；兔抗phos⁃phoT446⁃PKR 抗体购自美国SAB 公司，兔抗IL⁃1β抗体、兔抗NLRP3抗体、兔抗Caspase⁃1 抗体购自美国Abcam 公司；……