表儿茶素对大鼠缺血再灌注后神经元凋亡及Caspase⁃3、Bcl⁃2、Bax 蛋白的影响
2021-05-27黄凡李德丽蒋嫦月胡婉湘谢露
黄凡 李德丽 蒋嫦月 胡婉湘 谢露
缺血性脑血管病是临床多见的脑血管疾病,临床上首选恢复血氧供应,在恢复血流的同时将进一步加重损伤,称之为脑缺血再灌注损伤(Cere⁃bral ischemia reperfusion injury,CIRI)。神经元凋亡是CIRI 的主要环节,抗凋亡治疗可能成为脑缺血治疗的主要内容。表儿茶素(Epicatechin,EC)主要存在于可可、绿茶中,易透过血脑屏障,其抗炎、抗氧化、抗肿瘤等药理活性已作广泛研究,也有研究表明EC 可抑制牛磺酸脱氧胆酸诱导的Huh7 细胞促凋亡蛋白Bax 表达,细胞色素C 释放及p38 蛋白激酶磷酸化从而抑制线粒体损伤导致的细胞凋亡[1],这表明EC 在抗神经元凋亡上具有潜在的价值。本研究通过观察EC 对大鼠CIRI 后缺血侧脑皮质区神经元凋亡及Caspase⁃3、Bcl⁃2、Bax 蛋白的影响,旨在为临床治疗缺血性脑血管病提供新的思路。
1 材料与方法
1.1 实验动物与材料 (1)实验动物54 只雄性SD 大鼠,体质量200-240 g,购自广西医科大学实验动物中心,动物许可证号SCXK(桂)2020-0003。(2)主要材料表儿茶素,纯度≥98.0%(北京索莱宝科技有限公司);BCA 蛋白浓度测定试剂盒(增强型)、一抗稀释液(碧云天生物技术);通用型抗体稀释液(新赛美生物科技有限公司);兔抗大鼠β⁃tublin 抗体;兔抗大鼠Caspase⁃3 抗体,兔抗大鼠Bax 抗体,兔抗大鼠Bcl⁃2 抗体(华安生物);Dylight 800 标记山羊抗兔二抗(CST 公司)。
1.2 实验方法 (1)动物分组与造模将大鼠随机分为假手术组(Sham 组)、模型组(I/R 组)、EC5mg/kg 组、EC10mg/kg 组、EC20mg/kg 组、依达拉奉(ED)3mg/kg 组,每组9 只。除Sham 组外,其余组采用线栓法制备大脑中动脉栓塞模型(MCAO)[2],大鼠经腹腔注射2%戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉后,仰卧位固定,颈部去毛,消毒,纵向……
