不同分子量的枸杞多糖组分对树突状细胞成熟的影响①
2021-05-26陈艳平廖海锋王青罗霞邓向亮周联广州中医药大学广州510006
陈艳平 廖海锋王青 罗霞 邓向亮 周联(广州中医药大学,广州 510006)
近年来,多糖的研究逐渐引起重视,其组成较为复杂,分子量可从几千到几十万[1]。目前研究认为,多糖生理功效和生物活性与其分子量大小、聚合度、分支度及溶液中高级构象等有关,多糖分子量太大或太小均会引起其活性下降[2]。多糖的相对分子量越大,体积越大,越不利于多糖跨越多重细胞膜进入生物体内发挥生物学活性,但分子量过低也无法形成产生活性的聚合结构[3]。
枸杞子为茄科植物宁夏枸杞(Lycium bar-barum L.)的干燥成熟果实,具有滋补肝肾、益精明目的功效,是一种常见的药食同源的中药材。现代药理学研究表明,枸杞多糖(Lycium barbarumpolysaccharides,LBPs)是枸杞的主要活性成分,具有增强免疫功能、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、抗肝损伤、降血糖等多种生物学活性或药理作用[4‐7]。多项研究表明,LBPs可促进树突状细胞(dentritic cells,DCs)的分化和成熟,其活性可能与分子量大小有关[8‐10]。课题组前期试验采用膜分离技术从枸杞粗多糖中分离得到不同分子量的枸杞多糖组分(LBP2、LBP3、LBP4和LBP5)[11]。本文比较不同分子量的多糖组分促进DCs成熟的差异,筛选出活性最强的组分,为枸杞多糖的进一步研究和利用提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试品LBPs组分:不同分子量LBPs组分由广州泽力生物技术有限公司通过膜透析技术分离纯化所得。按照分子量的大小分别为LBP2(分子量350~400 kD,糖66.88%,水12.8%)、LBP3(分子量40~350 kD,糖54.47%,水14.59%)、LBP4(分子量8~40 kD,糖56.53%,水14.88%)、LBP5(分子量3~8 kD,糖55.21%,水15.85%)。
1.1.2 试剂RPMI1640培养基(Gibco公司);胎牛血清(Biological Industries公司);Murine GM‐CSF和Murine IL‐4(PerproTech公 司);PE/Cy7 anti‐mouse CD11c antibody、FITC anti‐mouse CD80 antibody、PE anti‐mouse MHCⅡ(I‐A)、PE/Cy5 anti‐mouse CD86 antibody(eBioscience公司);脂多糖LPS(Sigma‐Al-drich公司);……
