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补肾活血方对抗磷脂综合征小鼠母胎界面VEGF、HIF‐1α、TGF‐β、sflt‐1蛋白表达影响研究①

2021-05-26韩永梅刘蔚霞肖惠冬子卫爱武河南中医药大学郑州450000

中国免疫学杂志 2021年4期
关键词:小鼠剂量模型

韩永梅 刘蔚霞肖惠冬子 卫爱武(河南中医药大学,郑州 450000)

抗磷脂综合征(anti‐phosphoric syndrome,APS)是导致复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的主要病因,以体内产生大量抗磷脂抗体(an-tiphospholipid antibodies,APL)为特征[1]。APL通过抑制前列腺素,增加胎盘血栓素,促使低密度脂蛋白被滋养细胞氧化,抑制滋养细胞分化,造成胎盘功能不全,导致流产[2]。母胎界面血管发生和血管化是胎盘蜕膜毛细血管网络构建的基础。研究表明RSA小鼠存在蜕膜血管减少、血管内皮细胞破坏等病理变化,血管生长因子失衡是导致RSA的重要原因之一[3‐5]。本文研究补肾活血方对抗磷脂综合征模型小鼠母胎界面VEGF、HIF‐1α、TGF‐β、sflt‐1蛋白表达的影响,探讨APS致RSA的发病机制及治疗机理。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物42只,6~8周龄BALB/c雌性小鼠,平均体重(20.00±0.20)g,购自辽宁长生生物技术股份公司,SPF级,许可证号:SCXK(辽)2015‐0001,屏障环境标准饲养,恒定湿度(40%~55%)及恒定温度(25±1℃),高压灭菌的水和标准饲料供动物自由食用。连续观察1周无异常者入组实验。实验研究过程严格遵守减量化、再利用和再循环的原则。本研究经河南中医药大学第一附属医院伦理委员会审查通过,伦理审查编号2009HL‐053‐03。

1.1.2 主要试剂与药品全蛋白提取试剂盒、BCA蛋白浓度测定试剂盒、一抗二抗去除液、SDS‐PAGE凝胶快速制备试剂盒、Western洗涤液、SDS‐PAGE蛋白上样缓冲液、HIF‐1α antibody、VEGF antibody、TGF‐β1 antibody、sflt‐1 antibody、羊抗兔IgG‐HRP、内参抗体β‐actin(万类生物有限公司)。补肾活血方药:菟丝子30 g、桑寄生15 g、续断15 g、阿胶15 g、当归10 g、熟地黄20 g、川芎6 g、党参20 g、白术15 g、海螵蛸12 g、藕节炭15 g、白芍30 g、炙甘草6 g,采用江阴天江药业有限公司生产的颗粒剂型,由河南中医药大学第一附属医院颗粒剂药房提供。……

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