伊敏努尔·吐尔逊 张 茜 白文梅（新疆自治区中医医院呼吸科，乌鲁木齐830000）

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一，发病率和死亡率增长速度居恶性肿瘤第一位，近年来大气环境恶化导致患肺癌发病率升高［1］。肺癌细胞增殖并转移至淋巴结、胸膜、肾脏、消化道、骨等部位会加重疾病，影响患者生命安全，因此探究影响肺癌细胞增殖、转移因素对明确肺癌发生发展机制至关重要［2］。微小RNA（microRNA，miRNA）可参与调控细胞增殖、分化、凋亡等生物学过程，在肿瘤发生发展中发挥重要作用［3］。miR-331-3p在结直肠癌中高表达抑制细胞生长，在胃癌中作为肿瘤抑制基因参与调控细胞增殖，但尚未发现其在肺癌细胞增殖作用中的研究［4］。本研究通过检测肺癌A549细胞中miR-331-3p对细胞增殖的影响，并探讨其作用机制，以期揭示miR-331-3p在肺癌发生发展中作用，为寻找有效生物靶标、实现肺癌控制提供一定理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料 正常肺上皮BEAS-2B细胞和肺癌A549细胞均购自中国科学院上海细胞库。DMEM、RPMI1640培养基、胎牛血清、LipofectamineTM2000转染试剂盒（美国Invitrogen，货号：A12861-01、11875101、16000044、11668019）；CCK-8试剂盒（美国GlpBio，货号：GK10001）；TRIzol（美国Thermo-Fisher，货号：S0001）；cDNA反转录试剂盒、2×SYBR Premix Ex TaqTMⅡProbe QPCR Mix（美国Fermentas，货号：K1622、RR391S）；多聚甲醛（上海信凯生物医药科技有限公司，货号：30525-89-4）；Gimsa染液（上海研载生物科技有限公司，货号：a-03175）；蛋白裂解液（北京索莱宝科技有限公司，货号：R0010）；人增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）（抗兔）、细胞核相关抗原（nuclearassociated antigen，Ki67）（抗兔）、脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase B，PI3K）（抗鼠）、蛋白激酶B（protein Kinase B，PKB又称AKT）（抗兔）、p-AKT（抗兔）、GAPDH（抗鼠）、羊抗兔、羊抗鼠（美国Abcam，货号：ab152112、ab2438 78、ab140307、ab18785、ab38449、ab9484、ab150077、ab150117）；DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒（碧云天生物科技有限公司，货号：P0203）；……