多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢组织BMP-15及子宫内膜Glycodelin-A的表达*
2021-05-24李云秀官洁马蕊徐永芳钟兰萍俞健梅
李云秀 官洁 马蕊 徐永芳 钟兰萍 俞健梅
(云南省第一人民医院·昆明理工大学附属医院生殖医学科,云南 昆明 650032)
多囊卵巢综合征(Polycystic Ovary Syndrome,PCOS)是育龄妇女中最常见的内分泌紊乱疾病,主要表现为稀发排卵或无排卵和高雄激素血症,是无排卵性不孕的主要原因,而怀孕后流产率高达20%~50%,是正常女性的3~10倍[1]。研究认为与PCOS卵子质量、代谢异常和子宫内膜容受性下降有关[2-3]。本研究拟通过检测PCOS大鼠卵巢组织骨形态发生蛋白-15(bone morphogenic proteins 15,BMP-15)以及子宫内膜表达的糖蛋白因子Glycodelin-A(GdA),分析PCOS卵泡发育异常及子宫内膜容受性下降的机制。
1 材料和方法
1.1 实验动物 选择21日龄SD雌性大鼠(21日龄大鼠断乳,进入性发育期,至42日龄性发育成熟)共75只,体质量(53.8±9.2)g,购自南京东极生物科技,饲养于昆明医科大学动物实验室,清洁级饲养,环境温度20~23 ℃,湿度40%~60%,每日光照12 h,自由饮水,喂以标准大鼠颗粒饲料。
1.2 主要试剂、仪器 脱氢表雄酮(DHEA)针剂(上海麦克林生化科技公司),全自动生化分析仪器(美国Beckman Coulter公司),BMP-15及FSHR抗兔/鼠通用型免疫组化试剂盒(美国Abcam公司),孕马血清(PMSG)(赤峰博恩药业),Gd-A和LIF 酶联免疫(ELISA)试剂盒(上海双赢生物科技公司),Gd-A和LIF抗兔/鼠通用型免疫组化试剂盒(美国Abcam公司)。
1.3 分组及PCOS大鼠模型构建 SD大鼠适应性喂养2 d后于23日龄开始造模,随机分为正常对照组(对照组)25只和PCOS模型组(PCOS组)(50只,按照标准化动物实验最低动物例数,每组不少于25例,考虑有PCOS大鼠建模失败可能,故PCOS组大鼠为对照组大鼠数量2倍)。两组大鼠体重、空腹血糖(FBG)、血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、孕激素(P),促卵泡生长激素(FSH)、促黄体生成素(LH)及空腹胰岛素(FINs)无明显差异(表1)。……
