董小敏 李睿 杨进 李娜

(1.咸阳市中心医院检验科，陕西 咸阳 712000；2.咸阳市中心医院生殖医学科，陕西 咸阳 712000；3.海南医学院热带医学与检验医学院，海南 海口 571199)

卵巢早衰(premature ovarian failure，POF)是指女性在40岁前由于某种原因出现卵巢功能衰竭，进而出现闭经、雌激素紊乱等症状的妇科疾病[1]。临床调查显示，POF发病率约为1%～3%，近年来随着我国女性生活压力的不断增加，POF发病率逐年升高，给女性身心健康造成严重影响[2]。目前，临床常采用激素替代或促排卵等方法治疗POF，但不良反应较多，复发率高，且可增加卵巢癌发生风险。研究显示，骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)在抑制卵巢颗粒细胞凋亡、修复受损卵巢组织方面发挥积极作用，且BMSCs易于获得，在干细胞治疗领域成为研究热点[3-4]。近年来研究表明，POF卵巢组织与正常卵巢组织间存在多种差异表达的微小RNA(microRNA，miRNA)，其中miR-204-5p是表达上调最多的miRNA之一，在调节卵巢功能、雌激素分泌等方面发挥重要作用[5]。研究报道，转染miRNA的BMSCs可提高抑制后细胞的存活能力，进而改善治疗效果[6]。目前，关于miR-204-5p对POF卵巢颗粒细胞凋亡调控机制方面研究尚少，本研究将稳定转染低表达miR-204-5p的BMSCs注射至POF大鼠，评估沉默miR-204-5p及联合BMSCs对POF大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响，并初步探讨影响机制，为临床POF治疗提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 选取SPF级雌性Wistar大鼠，6周龄，体质量180～200g，购自北京华阜康生物科技股份有限公司，生产许可证号:SCXK(京)2019-0008，使用许可证号:SYXK(京)2019-0022。饲养条件为(26±2)℃恒温、40%～60%湿度、12 h/12 h明暗交替环境中，自由饮水和进食。……