异丙酚通过上调 miR-520a-3p抑制Wnt/β-catenin信号通路调控乳腺癌细胞
2021-05-21张顺吉朱洪宽李超王刚
张顺吉 朱洪宽 李超 王刚
(曲靖市第一人民医院麻醉科,云南 曲靖 655000)
据统计,乳腺癌发病率位居女性癌症首位[1]。乳腺癌的治疗取得了长足进步,虽然靶向治疗、内分泌治疗和联合治疗已成为患者个性化治疗的研究重点,但手术仍然是早期患者的最佳选择[2-3]。麻醉是手术中的重要环节,近年来研究表明部分麻醉药具有一定的抗肿瘤作用[4]。异丙酚(propofol,PROP)是一种快速,短效的静脉麻醉剂,临床广泛应用于诱导和维持麻醉,近年研究发现,异丙酚还可影响肿瘤的生长增殖及转移[5]。在肝癌中,静脉麻醉剂PROP通过抑制Wnt/β-catenin信号通路抑制肝癌的生长和侵袭[6]。PROP还可通过抑制Wnt信号通路抑制胶质瘤的生长[7]。镇静剂右美托咪定可通过上调miR-520a-3p抑制骨肉瘤细胞的增殖和迁移,促进凋亡[8]。在乳腺癌中,miR-520a-3p表达下调,其高表达抑制癌细胞增殖,迁移和侵袭[9]。因此假设麻醉剂PROP通过上调 miR-520a-3p抑制Wnt/β-catenin信号通路调控乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移。本课题以乳腺癌细胞系MCF-7为研究对象,研究不同浓度PROP对MCF-7细胞增殖、侵袭和迁移的影响,并探讨miR-520a-3p在此机制中的作用,对假设进行验证,以期为乳腺癌提供新的靶点。
1 材料与方法
1.1 材料 人乳腺癌细胞系MCF-7和BT-549(购自ATCC);胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)、胰蛋白酶Trypsin和DMEM高糖(dulbecco's modified eagle medium)培养基(购自美国Gibco公司);异丙酚(纯度99.1%,购自上海陶素生化科技有限公司);二甲基亚矾(Dimethyl sulfoxide,DMSO)和四氮唑蓝(Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide,MTT)(购自Sigma-Aldrich公司);Transwell板(购自美国Corning公司);引物、miR-520a-3p模拟物(miR-520a-3p)、miR-520a-3p抑制剂(anti-miR-520a-3p)、对照(miR-con和anti-miR-con)(购自苏州吉玛基因股份有限公司);Cyclin D1抗体、MMP-2抗体、MMP-9抗体、β-catenin抗体和β-actin抗体(购自美国Santa Cruz公司);……
