李萍 陈磊 杨梅 彭俊杰 文富强

(四川大学华西医院呼吸与危重症医学科，四川 成都 610041)

慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)是一种以持续呼吸道症状和气流受限为特征的慢性疾病[1-2]。目前认为，吸烟是慢阻肺最主要的危险因素之一，香烟烟雾诱导的气道炎症反应是慢阻肺的主要病理基础[1,3-4]，但其分子机制仍有待阐明。表观遗传指在不改变DNA序列的情况下，使遗传表型发生变化。表观遗传修饰是基因调控的重要机制[5]。近年来研究表明，DNA甲基化，作为一种常见的表观遗传修饰，与慢阻肺易感性、急性加重及预后密切相关[6]，且香烟烟雾可直接导致气道DNA甲基化的改变[7]，说明DNA甲基化可能介导机体对(内)外环境的刺激，进而参与慢阻肺的炎症反应过程[8-9]，但目前关于DNA甲基化在香烟诱导的气道炎症中的变化和作用机制尚不完全清楚。本研究拟通过构建香烟烟雾诱导的气道炎症小鼠模型，利用全基因组甲基化捕获测序技术，筛选其炎症反应过程中的差异甲基化基因，并初步分析基因功能，为深入探讨甲基化修饰在慢阻肺中的调控作用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物与试剂 SPF级C57BL/6系雄性小鼠(7～9周龄，体重20～22 g)购自四川大学实验动物中心。总DNA提取试剂盒购自Qiagen公司，甲基化试剂盒购自Agilent公司。

1.2 模型构建与取材 参照文献[10]将20只小鼠随机分为对照组(WT)与熏烟组(CS)，每组10只，分别暴露于过滤空气和香烟烟雾，每次2 h，每天两次，每周6 d，连续4 w。所有小鼠在暴露4 w后的第1天被放血处死，取小鼠右肺组织，4%多聚甲醛(pH 7.4)固定，常规石蜡包埋；……